ブドウ球菌由来表皮剥脱毒素ファミリーの同定および皮膚感染症における作用機序の解析

葡萄球菌表皮松解毒素家族的鉴定及其在皮肤感染中的作用机制分析

• 批准号: 04J07525
• 负责人: 西藤 公司
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J07525/
• 关键词: 表皮剥脱毒素; ブドウ球菌; プロテアーゼ; 細胞接着; デスモグレイン; 膿痂疹; ブドウ球菌性熱傷様皮膚症候群; 皮膚感染症; ブドウ球菌性熱傷様症候群

本年度は、水疱性膿痂疹あるいはブドウ球菌性熱傷様皮膚症侯群(SSSS)における表皮内水疱が、黄色ブドウ球菌由来表皮剥脱毒素(ET)によるDsg1の切断のみにより生じるか、あるいは切断後のDsg1を含むデスモソーム構成蛋白の細胞内移動が重要となるか検討した。新生仔マウスにETAを投与し、投与後におけるデスモソーム構成蛋白の経時的な細胞内動態を蛍光抗体法により観察した。その結果ETA投与マウスにおいて、投与後約30分よりDsg1切断端のN末端側が角化細胞膜表面から消失したのに続き、投与後60分よりマウス表皮上層に病理組織学的な水疱が観察された。水疱に面した角化細胞の一部では、ETA投与後60分よりDsg1切断端のC末端側が細胞質内に認められたが、多くの角化細胞ではDsg1のC末端側が水疱面の角化細胞膜上に残存した。また水疱に面した角化細胞では、Dsg1と共発現する接着蛋白デスモコリン1、さらにデスモソームの細胞内蛋白であるプラコグロビンやデスモプラキンもまた、水疱面の角化細胞膜上に残存した。さらにETA投与後60分において、透過型電子顕微鏡を用いた観察により半割デスモソームが水疱面の角化細胞膜上に認められた(Nishifuji et al. manuscript in preparation)。以上の一連の結果より、水疱性膿痂疹やSSSSにおいては、 ETによるDsg1の切断が表皮内水疱の直接的な原因となる可能性が示唆され、これらの疾患における水疱形成機序を紬胞レベルで説明することが可能となった。今後は表皮剥脱毒素ファミリーとDsg1との結合様式について、結晶構造解析ならびに生化学的手法を用いた解析が行われると共に、ET-Dsg 1間の酵素基質反応を特異的に阻害する皮膚感染症の新規治療法が開発されることが期待された。

This year, vesicular pustulosis, including fungal heat injury syndrome (SSSS), epidermal blistering, xanthococci derived epidermal exfoliating toxin (ET), Dsg1 and Dsg1 after cleavage were discussed. The intracellular dynamics of the newborn's ETA during and after administration were observed by light antibody assay. The results showed that the surface of keratinized cell membrane disappeared at the N-terminal side of Dsg1 cut end about 30 minutes after ETA injection, and the blisters in the upper epidermis were observed pathologically at 60 minutes after ETA injection. 60 minutes after ETA administration, a portion of keratinized cells on the blister surface remained on the cytoplasm of keratinized cells on the C-terminal side of Dsg1. The cellular proteins in the keratinized cells on the blister surface remain on the keratinized cells on the blister surface. After 60 minutes of ETA injection, transmission electron microscopy was used to observe the surface of keratinized cells on the blister surface (Nishifuji et al. manuscript in preparation). The above results indicate that pustulosis vesiculosa, SSSS, ET and Dsg1 may be the direct cause of intradermal blisters. In the future, we hope to develop new methods for the treatment of skin infections by combining epidermal exfoliating toxin with Dsg1, analyzing crystal structure, analyzing biochemical methods, and analyzing enzyme matrix reaction between ET-Dsg1.

项目成果

IgG autoantibodies directed against desmoglein 3 cause dissociation of keratinocytes in canine pemphigus vulgaris and paraneoplastic pemphigus

针对桥粒芯糖蛋白 3 的 IgG 自身抗体导致犬寻常型天疱疮和副肿瘤性天疱疮角质形成细胞解离

• 发表时间: 2007
• 期刊: Vet Immunol Immunopathol 117
• 作者: Nishifuji K;et. al.
• 通讯作者: et. al.

A canine pemphigus foliaceus case showing parallel relationship of disease activity and titer of serum anti-keratinocyte cell surface antibodies

犬落叶型天疱疮病例显示疾病活动度与血清抗角质形成细胞表面抗体滴度的平行关系

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Veterinary Medical Science 67・9
• 作者: Nishifuji K;Yoshida-Yamakita K;Iwasaki T
• 通讯作者: Iwasaki T

Detection of circulating autoantibodies using living keratinocyte staining on MCA-B1 method in dogs with pemphigus foliaceus

MCA-B1法活角质形成细胞染色检测落叶型天疱疮犬循环自身抗体

• 发表时间: 2004
• 期刊: Research in Veterinary Science 77・2
• 作者: Honda R;Nishifuji K;Olivry T;White SD;Momoi Y;Iwasaki T
• 通讯作者: Iwasaki T

Defining the pathogenic involvement of desmoglein 4 in pemphigus and staphylococcal scalded skin syndrome

• DOI: 10.1172/jci200420480
• 发表时间: 2004-11-01
• 期刊: JOURNAL OF CLINICAL INVESTIGATION
• 影响因子: 15.9
• 作者: Nagasaka, T;Nishifuji, K;Amagai, M
• 通讯作者: Amagai, M

Interdigital involvement in a case of primary cutaneous canine histoplasmosis in Japan.

日本一例原发性皮肤犬组织胞浆菌病指间受累。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Veterinary Medicine Series A 52・9
• 作者: Nishifuji K;Ueda Y;Sano A;Kadoya M;Kamei K;Sekiguchi M;Nishimura K;Iwasaki T.
• 通讯作者: Iwasaki T.