低温誘導性細胞膜修復タンパク質に注目した植物耐凍性機構の解明とその応用

以冷诱导细胞膜修复蛋白为核心阐明植物耐冻机制及其应用

• 批准号: 04J09436
• 负责人: 河村 幸男
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Iwate University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J09436/
• 关键词: 耐凍性; 細胞膜; 膜修復; シロイヌナズナ; 植物; 低温順化

昨年度計画の目標は、1)EGTA、Ca^<2+>、Mg^<2+>存在下でのプロトプラストを用いた低温馴化前後での生存率の測定、2)synaptotagmin-likeタンパク質の特異抗体の作製、3)anti-synaptotagmin-like protein存在下でのプロトプラストを用いた低温馴化前後での生存率の測定、4)抗体を用いた内膜synaptotagmin isoformの検索とTOF-MSによる同定、の4項目であった。このうちの2項目めまではほぼ達成でき、3項目めの実験を検討しているときに、岩手大学農学部COE助教授として赴任することになり、日本学術振興会特別研究員を途中辞退することになった。2項目までの結果をまとめと、1)耐凍性の半分以上はCa^<2+>依存性であり、少なくともCa^<2+>は0.5mM以上必要であることが明らかとなった、2)synaptotagmin-likeタンパク質の重要なドメインであるC2Aドメインのペプチド抗体を作製したところ、synaptotagmin-likeタンパク質に特異的に反応する抗体が得られた。Mg^<2+>はこのCa^<2+>依存性の細胞膜修復に対して拮抗阻害することが報告されているので(Steinhardt et al. 1994)、当初はMg^<2+>存在下での生存率測定も行うことも検討されていた。しかしCa^<2+>依存性の耐凍性が以上の実験で十分に示されたので割愛することにした。上記に記したとおり、申請者は平成17年度1月15日より岩手大学農学部COE助教授として赴任することになったが、今回の研究で得られた実験結果を下に、引き続き、また実験規模を拡大し、低温馴化後の細胞の凍結に対する安定性上昇のメカニズムを細胞膜修復機構の観点から更なる研究を行っていく予定である。

The objectives of the previous year's project were: 1) determination of survival rate before and after cold acclimation in the presence of EGTA, Ca^<2+> and Mg^<2+>; 2) production of specific antibodies to synaptotagmin-like protein; 3) determination of survival rate before and after cold acclimation in the presence of anti-synaptotagmin-like protein; 4) identification of TOF-MS in the membrane in the presence of antibodies 4 items. 2 projects, 3 projects, COE Assistant Professor, Faculty of Agriculture, Iwate University, Special Researcher, Japan Society for the Promotion of Science 2. The results of these items are as follows: 1) More than half of the freezing resistance depends on Ca^<2+>, less on Ca^<2+> and more than 0.5 mM is necessary; 2) Synaptagmin-like anti-C2 A anti-C2 A anti-C2 A Mg^<2+>-dependent cell membrane repair antagonizes damage reported previously (Steinhardt et al. 1994), and survival measurements performed initially in the presence of Mg^<2+>-are discussed. Ca^<2+> dependency and frost resistance are very important to us. The applicant was appointed as Assistant Professor of COE, Faculty of Agriculture, Iwate University on January 15, 2017. The results of this study were as follows: The scale of the study was increased, the stability of the frozen cells after low temperature acclimation was increased, and the study on the repair mechanism of cell membrane was carried out.