精子形成関連遺伝子発現プロファイリングの解析と男性不妊に対するテーラーメイド治療

精子发生相关基因表达谱分析和男性不育症的定制治疗

• 批准号: 04J53252
• 负责人: 徳田 倍将
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J53252/
• 关键词: E-cadherin; 未分化型精祖細胞; クラスター; c-Kit; c-Ret; GFRα1; Plzf; 精祖幹細胞; Notch1; Notch3; エレクトロポレーション; BrdU; Busulfan

精子形成段階特異的なマーカーをマウスの精巣を使って探索したところ、E-cadherinが基底膜上に接触している平坦な形をした細胞のみで発現していることが分かった。E-cadherin陽性細胞はヘテロクロマチンが存在せず、α6integrin、β1integrin、Ep-CAMを発現していた。精細管のホールマウント抗体染色によりE-cadherin陽性細胞は単独又は少数の細胞がお互いに接触してクラスターを形成しており、そのクラスターの細胞の数は主に2,4,8個であった。これらの結果からE-cadherin陽性細胞は未分化型精祖細胞であることが分かった。未分化型から分化型精祖細胞への転換が起こるステージVII〜VIIIでE-cadherin陽性細胞の大部分がc-Kitを発現し始め、ステージIXになると二重陽性細胞は稀になった。このことからE-cadherinの発現はA_1精祖細胞に分化すると消失することがわかった。精祖幹細胞のマーカーとされているc-RetやGFRα1陽性細胞は全てE-cadherin陽性であり、殆どが単独もしくは2個のE-cadherin陽性細胞で発現していた。またPlzfも全てE-cadherin陽性細胞で発現していた。BrdU取り込み実験からE-cadherin陽性細胞はE-cadherin陰性精祖細胞より細胞周期が非常に長く、busulfanによる精巣の再生実験においてE-cadherin陽性細胞のみが生き残り、その後精子形成が再開されたことから幹細胞の特長を持っていることが分かった。W/W^vマウスにE-cadherin陽性又は陰性細胞を移植したところ、E-cadherin陽性細胞を移植した群のみコロニーを形成したことから精祖幹細胞はE-cadherin陽性細胞の集団に含まれていることが分かった。

The spermatogenesis stage is characterized by the ability to explore the contact on the basement membrane, the flat shape, the cell surface, and the E-cadherin cell surface. The presence of E-cadherin, α-6integrin, β-1integrin, and Ep-CAM was detected in the presence of phenotype. The spermatozoa were stained with anti-E-cadherin antibody staining, and only a few cells were exposed to each other. The number of cells in each cell was 2, 4, 4 and 8, respectively. The results showed that the undifferentiated ejaculatory progenitor cells of E-cadherin were divided into two groups. Most of the undifferentiated spermatid progenitor VII~ VIIIE-cadherin sexual progenitor cells show their origins, and most of them show their origins, IX genes, and double sex cells. The cell differentiation of ACE1 was detected by E-cadherin. It disappeared. The whole c-Ret

项目成果

哺乳動物のA型(未分化型)精祖細胞の同定、分離及び/又は回収する方法、ならびに当該細胞の用途に関する。

本发明涉及用于鉴定、分离和/或回收哺乳动物A型（未分化）精原细胞的方法以及所述细胞的用途。

• 发表时间: 2005