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発生工学技術を用いた希少鳥類種の維持・増殖法の開発に関する研究

利用发育工程技术开发珍稀鸟类维持繁殖方法研究

基本信息

批准号：
15710175
负责人：
川嶋貴治
金额：
$ 2.37万
依托单位：
National Institute for Environmental Studies
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

鳥類における発生工学技術を用いれば、始原生殖細胞(胚発生の一時期に出現する精子や卵子の祖細胞)を移植した生殖巣キメラから子孫個体を創出することが可能である。この技術は、絶滅危惧種問題を解決するための新手法となる可能性が高いにも関わらず、実際の希少種に適用するには、乗り越えなければならない問題が多いのも現状である。そのなかでも、生殖巣キメラを効率良く作出するために、始原生殖細胞の機能を保持したまま、生存・増殖する培養系の開発が強く求められている。本研究の結果、初期胚由来の線維芽細胞との共培養系において、少数の(最低1個からの)始原生殖細胞が増殖し、コロニーを形成するものが観察された。この結果は、体細胞から放出される因子によって、始原生殖細胞の生存と増殖が促進されることを示している。しかしながら、鳥類の始原生殖細胞に発現しているサイトカインレセプター等については不明であるため、培養下で増殖性を向上させることは極めて困難であった。そこで、鳥類の始原生殖細胞に特異的に発現する遺伝子の同定を行うために、単離した始原生殖細胞からcDNAライブラリーを作製した。約35000個のニワトリ始原生殖細胞からRNAの抽出を行い、約20ngのtotal RNAを回収した。SMART法を用いることで、このような微量なRNAからも、完全長cDNAライブラリーを作製することができた。本研究で作製したcDNAライブラリーにおいて、vasaやc-kitに代表される生殖細胞特異的な遺伝子の発現を確認した。

Bird's biological engineering technology uses sperm, primordial germ cells (the first stage of embryonic development) It is possible to create individual offspring through transplantation of egg (progenitor cells). The problem of endangered species is solved by technology and new methods, and the probability is high and the risk of extinction is high. , 実记の思小草にapplicable するには, 成り日えなければならないproblem が多いのもcurrent situation である.そのなかでも, GENERAL RESULTS キメラを efficiently made するために, primordial germ cell のThe functions are maintained and the survival and reproduction are cultivated. The results of this study include the co-culture system of embryonic germ cells and the multiplication of a small number of primordial germ cells (minimum of 1) and the formation of embryonic germ cells. It results in the release of somatic factors, somatic cells release factors, and the survival and reproduction of primordial germ cells promotes growth.しかしながら、Bird Primitive Germ Cell に発appears しているサイトカインレセプターetc.いてはUnknown であるため、Cultivated でProliferative をUp させることは Extremely めてDifficult であった.そこで, the primordial germ cells of birds are specific, and the original primordial germ cells of birds are the same as the original primordial germ cells. Approximately 35,000 primordial germ cell RNAs were extracted and processed, and approximately 20ng of total RNA was recovered. The SMART method uses いることで, このようなmicroRNA からも, and full-length cDNA ライブラリーを to produce することができた. In this study, the production of cDNA DNA and the vasa c-kit, which represent germ cell-specific genes, have been confirmed.