歯周病原性細菌のLPSが誘導する歯槽骨吸収へのTLR4の関与

TLR4参与牙周病原菌LPS诱导的牙槽骨吸收

• 批准号: 15791242
• 负责人: 森山 弘隆
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15791242/
• 关键词: A.actinomycetemcomitans; LPS; 破骨細胞; 免疫組織学的研究; TLR4

グラム陰性細菌のLPSは免疫系細胞を活性化し、IL-1βやTNF-αなどのの炎症性サイトカインを産生して破骨細胞を誘導する。破骨細胞の形成にはreceptor、activator of NF-κB ligand (RANKL)が促進的に関与している。またLPS刺激の細胞内シグナル伝達にはTLR2やTLR4が関与しており、TLR4遺伝子のmutationを持つC3H/HeJマウスはLPSに低応答性であることが知られている。今回はC3H/HeJマウスとC3H/HeN(LPS応答性)マウスの歯肉に歯周病原性細菌A.actinomycetemcomitans (A.a)由来LPSを投与して、それぞれの歯槽骨吸収と歯肉結合組織におけるIL-1β及びRANKL発現を比較した。A.a由来LPSを48時間毎に1、4,7,10回投与後、下顎骨を摘出して試料を作製し、H.E染色、TRAP染色及び免疫染色を施した。破骨細胞の活性吸収面ならびに免疫組織学的検索の結果、C3H/HeNマウスではLPSの投与回数が増すに連れて破骨細胞数が増加したのに対し、C3H/HeJマウスではほとんど変化がなかった。また、7、10回投与群におけるIL-1β及びRANKL陽性細胞数はC3H/HeNマウスと比較してC3H/HeJマウスは有意に少なかった。また同様にIL-6及,びTNF-αの歯肉結合組織における発現を比較したところ、C3H/HeNマウスではLPSの投与回数が増すにつれTNF-α陽性細胞数は増加する傾向にあったが、C3H/HeJマウスではいずれの免疫組織学的検索によっても陽性細胞数の著明な変化はみられなかった。以上のことよりA.a由来LPSによって誘導される歯槽骨吸収においては、TLR4を介してIL-1β、TNF-α産生やRANKL発現が調節されていることが示唆された。

LPS from LPS-negative bacteria activates immune-lineage cells and induces osteoclast production by IL-1β, TNF-α, and inflammatory cells. Osteoclast formation is related to the promotion of receptor and activator of NF-κB ligand (RANKL). LPS stimulated intracellular responses to TLR2 and TLR4, and mutations in TLR4 genes maintained C3H/HeJ responses to LPS. In this paper, C3H/HeJ and C3H/HeN(LPS responsive) are the pathogenic bacteria A.actinomycetemcomitans (A.a), which originated from LPS administration, and IL-1β and RANKL are expressed in the alveolar bone absorbing tissue. A. The samples were prepared, H.E stained, TRAP stained and immunostained every 1, 4, 7 and 10 times after LPS injection and mandible extraction. The results of the immunohistologic examination of osteoclast activity showed that C3H/He2 increased the number of LPS injected and the number of osteoclasts increased. The number of IL-1β and RANKL positive cells was significantly lower than that of IL-1β and RANKL positive cells after 7, 10 and 10 times of treatment. Compared with IL-6 and TNF-α, LPS expression and number of LPS increased, TNF-α positive cells increased, and TNF-α positive cells increased. The above expression of TNF-α and RANKL was induced by LPS and regulated by TLR4.