癌遺伝子による足場非依存性増殖能獲得のメカニズム

Crkによる足場非依存性増殖誘導の分子メカニズムの解析Crk-knockdown細胞を用いた解析から、インテグリン刺激によるp130CasのFocal-adhesionへの局在ならびにFAKとの複合体形成、さらにはFAKのチロシン燐酸化による活性化においてCrkが重要な役割を果たしている事が明らかになった。さらに、Crkの過剰発現によってインテグリン刺激非依存的にp130Cas-FAKの複合体形成が起こり、FAKが恒常的なに活性化される事が分かった。ヒト正常繊維芽細胞が示すRasによる足場非依存性増殖誘導に対する抵抗性ヒトの繊維芽細胞ではH-RasV12によるERKの活性化が齧歯類細胞と比較して有意に抑制されており、そのために、細胞形態の変化やFra-1の発現誘導、Caveolinの発現低下などのRas-transformed細胞で観察される典型的な変化がほとんど起こらないことが分かった。Fra-1の強制発現によって、足場非依存性増殖能ならびに造腫瘍能が顕著に増強されることより、この転写因子の発現抑制が、ヒト細胞のRas対する抵抗性の原因の一つであることが明らかになった。Rasの誘導発現系を樹立してさらに解析したところ、ヒト細胞でも一過性に非常に強いERKの活性化とともに顕著な細胞の形態変化が観察されたが、この様な細胞は増殖を続ける事が出来ず、結果的にERKの活性化が抑えられた細胞のみが増殖してくる事が分かった。ヒト正常繊維芽細胞のSrcによる足場非依存性増殖誘導活性型Src遺伝子を、不死化したヒトの繊維芽細胞に導入すると、齧歯類の場合と同様の非常に強い足場非依存性増殖能ならびに造腫瘍能が誘導されることを見出した。さらに、活性型Src発現ヒト細胞では活性型Ras発現細胞の場合よりもRaf/MEK/ERK/Fra-1経路ならびにPI3K/AKT経路が強く活性化されていた。

Crkによる足場非依存性増殖誘導の分子メカニズムの解析Crk-knockdown細胞を用いた解析から、インテグリン刺激によるp130CasのFocal-adhesionへの局在ならびにFAKとの複合体形成、さらにはFAKのチロシン燐酸化による活性化においてCrkが重要な役割を果たしている事が明らかになった。さらに、Crkの過剰発現によってインテグリン刺激非依存的にp130Cas-FAKの複合体形成が起こり、FAKが恒常的なに活性化される事が分かった。ヒト正常繊維芽細胞が示すRasによる足場非依存性増殖誘導に対する抵抗性ヒトの繊維芽細胞ではH-RasV12によるERKの活性化が齧歯類細胞と比較して有意に抑制されており、そのために、細胞形態の変化やFra-1の発現誘導、Caveolinの発現低下などのRas-transformed細胞で観察される典型的な変化がほとんど起こらないことが分かった。Fra-1の強制発現によって、足場非依存性増殖能ならびに造腫瘍能が顕著に増強されることより、この転写因子の発現抑制が、ヒト細胞のRas対する抵抗性の原因の一つであることが明らかになった。Rasの誘導発現系を樹立してさらに解析したところ、ヒト細胞でも一過性に非常に強いERKの活性化とともに顕著な細胞の形態変化が観察されたが、この様な細胞は増殖を続ける事が出来ず、結果的にERKの活性化が抑えられた細胞のみが増殖してくる事が分かった。ヒト正常繊維芽細胞のSrcによる足場非依存性増殖誘導活性型Src遺伝子を、不死化したヒトの繊維芽細胞に導入すると、齧歯類の場合と同様の非常に強い足場非依存性増殖能ならびに造腫瘍能が誘導されることを見出した。さらに、活性型Src発現ヒト細胞では活性型Ras発現細胞の場合よりもRaf/MEK/ERK/Fra-1経路ならびにPI3K/AKT経路が強く活性化されていた。