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組織硬さ分布計測と免疫組織学的手法を対応させた肝線維化率の評価

利用组织硬度分布测量和免疫组织学方法评价肝纤维化率

基本信息

批准号：
16760334
负责人：
村山嘉延
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

平成16年度に開発した「免疫組織学的手法に用いる薄組織切片の弾性率分布計測に適した走査型顕微鏡」の開発を継続すると共に、開発した装置を用い以下の手順で肝臓の硬変に関する以下の知見を得た。1.組織を生理的条件に維持したままに計測するための特殊なチャンバーを開発した。組織が水溶液に浸った状態では高感度の計測が実現できないため、スライス切片をメンブレン上に半浸法させ、センサが接触する表面にはポリ-L-リシン薄膜(約100nm)を張り水分の蒸発を防ぐと共にセンサの物理的接触条件を一定とした。2.ラットを実験動物として用い、チオアセタマイド(TAA:200mg/kg)注入法により硬変肝および慢性肝炎モデルを作成した。血液を生理食塩水で環流した後に臓器を取り出し、振動式マイクロスライサーを用いて固定せずに薄層切片を作製した(厚さ50〜300μm)。測定範囲900μm×900μmを30μm刻みで計961点計測した。現行のシステムではマイクロタクタイルセンサの周波数計測におけるサンプリング(毎秒200サンプル)が律速となり、計961点の計測に15分程度を要した。3.測定した薄層切片をアザン染色し、細胞質と膠原繊維を同定した。比較的厚い切片であるために、測定した表面のみを染色させるたアザン染色の各浸透時間や方法を改良した。4.ラット慢性肝炎において細胞質部位19.6±3.02kPa、膠原繊維部位43.6±8.54kPaであった。硬変肝では細胞質部位13.6±6.24kPa、膠原繊維部位43.0±7.73kPaであった。病状によらず各部位の弾性率はほぼ同じ値を示し、硬変肝の進行に伴い臓器が硬化するメカニズムは膠原繊維の蓄積と3次元構造の構築にある事が示された。

The method of immunology in Pingcheng 16 was used to calculate the distribution of sexual rate in thin tissue slices, to open the device, to use the following handheld, liver, liver and liver. 1. The physiological conditions of the organization are maintained, and the special conditions are required for the opening of the program. The tissue was immersed in aqueous solution. The high sensitivity measurement was used to determine the physical contact conditions of the water vapor. The contact conditions of the film (about 100nm) were determined. two。 The animal was used to treat chronic hepatitis. The method of injection (TAA:200mg/kg) was used to treat chronic hepatitis. The blood physiological food, water and ambient flow were removed from the machine, and the vibrating device was used to fix the thin section (thickness 50 ~ 300 μ m). The measured range is 900 μ m × 900 μ m, 30 μ m and 961 points. In order to measure the number of waves per week, the speed of the clock is very fast, the speed is very fast, and the temperature is 15 points. 3. Measure the thin slices, stain, and cells of the original sample. The thickness of the thick section was measured and the method of determining the penetration time of the surface dye was improved. 4. The cellular site of chronic hepatitis was 19.6 ±3.02kPa, and the original site of hepatitis was 43.6 ±8.54kPa. There were 13.6 ±6.24kPa and 43.0 ±7.73kPa in the cellular part of the sclerotic liver and the original liver respectively. The sexual rate of each part of the disease was the same as that of the cirrhotic liver, and the liver cirrhosis was accompanied by mechanical sclerosis. in the first place, the sexual rate of each part of the disease, liver cirrhosis, liver cirrhosis and liver cirrhosis.