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付着微生物細胞の生物的応答にもとづく抗菌・殺菌剤によるバイオフィルム抑制法

基于附着微生物细胞的生物反应，使用抗菌剂和杀菌剂的生物膜抑制方法

基本信息

批准号：
16760636
负责人：
西岡求
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

自然界に存在する微生物の多くは,バイオフィルムと呼ばれる不均一な集合体として存在しているが,近年,バイオフィルム中における細胞間の遺伝子水平伝播により,薬剤耐性因子などの拡散が生じる危険性が指摘されている.本研究では,バイオフィルム構造を模したモデル実験系において,浮遊状態の細胞と比較することにより,大腸菌の自然形質転換におよぼす細胞生育環境の影響に関する基礎的な検討を行った.モデルバイオフィルム実験系として,大腸菌IM302株及びProvidencia sp. WW2株をLB寒天培地上のナイロンフィルター面で培養した後,フィルターをCaイオンおよび培地成分を含む寒天培地に重層し,4℃および25℃で24時間保持した.ナイロンフィルター面上のIM302株を回収し,プラスミドDNAを加え,5℃で30分保持した後,コロニーカウンティング法により形質転換細胞数を求めた.浮遊系では,IM302株をCa^<2+>および培地成分を含む溶液で,4℃および25℃で24時間保持し,モデルバイオフィルム実験系と同様に形質転換細胞数を求めた.浮遊系では,25℃におけるLB培地を含む条件では,形質転換細胞はほとんど認められなかった.これは,25℃では細胞の増殖のため,細胞表層が再生され,CaイオンによるDNA受容能の誘導が無効となるためと考えられる.一方,モデルバイオフィルムにおいては,このような差異は見られなかった.モデルバイオフィルムではWW2株が障壁の役目を果たし,内側にあるIM302株への栄養供給を阻んだために増殖が抑制され,DNA受容能が維持されて形質転換が生ずるものと考えられた.したがって,バイオフィルム内では,細胞は環境因子の影響を受けにくく,一度獲得された形質転換能が維持され,その結果,遺伝子水平伝播が起こりやすいものと推察された.

There are many microorganisms in nature, such as heterogeneous aggregates. In recent years, there are many kinds of microorganisms in nature. In recent years, there are many kinds of microorganisms in nature. This study was conducted to investigate the effects of natural transformation of Escherichia coli on cell growth environment. Coliform bacteria IM 302 and Providencia sp. WW 2 strains were cultured on LB cold soil, and the components of E. coli IM 302 and Providencia sp. WW 2 strains were cultured on LB cold soil. IM 302 strain on the surface of the plant was recovered, and the DNA of the strain was added. After 30 minutes at 5 ℃, the number of cells with morphological change was calculated. In the suspension system, IM 302 strain is Ca ^<2 +>+ Planktonic system, 25 ℃, LB culture conditions, physical and qualitative change of cells. In this case, cell proliferation at 25 ℃, cell surface regeneration, Ca~(2 +), DNA uptake and induction are not possible. On the other hand, it's not easy to see the difference between them. WW 2 strain is a barrier to growth, and IM 302 strain is a barrier to growth, and DNA tolerance is maintained. In addition, cells are affected by environmental factors, and the quality of the cells is maintained. As a result, the level of transmission of genes is detected.