中胚葉誘導における予定外胚葉細胞の応答性の分子機構の解析

中胚层诱导过程中假定外胚层细胞反应性的分子机制分析

• 批准号: 16770169
• 负责人: 越田 澄人
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: National Institute for Basic Biology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16770169/
• 关键词: 発生・分化; 遺伝学; シグナル伝達; 発現制御; 遺伝子

中胚葉誘導は脊椎動物の発生過程において最初に見られる誘導現象であり、その後の形態形成に必須である。中胚葉誘導は時空間的に特異的に起こることが知られているが、その分子機構についてはまだ十分には理解されていない。そこで、我々が単離した中胚葉特異的遺伝子であるnt1遺伝子が神経胚期に予定中脳・後脳境界部で異所的に発現するゼブラフィッシュ突然変異体の表現型解析を行うことで、その分子機構の一端を理解することを目指している。単離されているnt1遺伝子を異所的に発現する変異体のうちkt541とkt658の2つの系統は、温度感受性と優性の母性効果を示したことから、その原因遺伝子の同定は比較的に困難になった。現在、変異部位と密接に連鎖するDNAマーカーを同定するために、kt541変異体に対して多くの多型を持つ別系統の野生型ゼブラフィッシュを数世代にわたって交配することで、変異部位近傍以外が別系統に組み変わった集団を確立し、変異部位の遺伝学的マッピングを試みている。さらにnt1遺伝子の異所的発現が見られる他の5つの変異体系統について、表現型の解析を行ったところ、1系統は色素を作るメラノサイトの減少が観察され、4系統は頭部の中枢神経系での細胞死が見られ、いずれも胚性致死を示した。これら5系統では、前述の2系統と比べてnt1遺伝子の異所的発現が非常に弱く解析が難しい。このことはヘテロの母親由来の正常な遺伝子産物が卵に供給されていることによる可能性があると考えられたので、現在、変異をホモに持つ胚の始原生殖細胞を別個体に移植する実験を行っている。これによってホモ個体の致死性が回避され、正常な遺伝子産物を持たない卵を得られることが期待される。このような卵が得られた後は、それに由来する胚の表現型を解析する予定である。

Mesoderm induction is necessary for the growth process of vertebrates and is necessary for the initial and subsequent induction of morphology. Mesodermal induction of time and space is very specific, and the molecular structure of the molecular mechanism is very clear.そこで、我々が単　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ifies in the embryonic periodするゼブラフィッシュ phenotypic analysis of the allogeneic sudden change を line うことで, そのmolecule mechanism のOne end をunderstanding することをocular finger している.単利されているnt1弝子を出　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ifies 　　　　　　　　　　　　　　ifies 　　　　　　　　　　　　　ifies 　　　　　　　　　　　　　　ifies 　　　　　　　　　　　　　ifies 　　　　　　　　　　　　　　ifies 　　　　　　　　　　　　　　ifies by a different bodyは, temperature sensitivity and superiority, maternal effect, したことから, そのcause, そ子の Same determination, にになった which is difficult to compare. Now, the different parts are closely linked and the DNA is linked to each other, k t541 変variant type に対して多くのmultitype をhold つspecific system のwild type ゼブラフィッシすることで, a group of different systems other than the close proximity of different parts The み変わった集団をestablishedし, the different parts of the の伝学's マッピングをtest みている.さらにnt1 缝子の性之発appearが见られるhimの5つの変variant system について, phenotypic analysis を行 ったところ, 1 system は色The 4-system は central nervous system of the head, the cerebrospinal fluid system, the cell death system, and the embryonic lethality system. The これら5 systemでは, the aforementioned の2 system とbiべてnt1 伝子のの社的発appearが is very weak and difficult to analyze.このことはヘテロのMother's originのnormalな缝子productがEGにsupplyされていることによるpossibilityがあるとKao られたので, now, 変different をホモにhold つEmbryo primordial germ cell を individual transplantation する実験を行っている.これによってホモIndividual fatality がavoidance され, normal な缝子product たないEGをget られることがawait される.このような Egg が got られた后は, それに origin するEmbryo のphenotype を ANALYSIS する Predetermined である.