中胚葉誘導における予定外胚葉細胞の応答性の分子機構の解析

中胚层诱导过程中假定外胚层细胞反应性的分子机制分析

• 批准号: 16770169
• 负责人: 越田 澄人
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: National Institute for Basic Biology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16770169/
• 关键词: 発生・分化; 遺伝学; シグナル伝達; 発現制御; 遺伝子

中胚葉誘導は脊椎動物の発生過程において最初に見られる誘導現象であり、その後の形態形成に必須である。中胚葉誘導は時空間的に特異的に起こることが知られているが、その分子機構についてはまだ十分には理解されていない。そこで、我々が単離した中胚葉特異的遺伝子であるnt1遺伝子が神経胚期に予定中脳・後脳境界部で異所的に発現するゼブラフィッシュ突然変異体の表現型解析を行うことで、その分子機構の一端を理解することを目指している。単離されているnt1遺伝子を異所的に発現する変異体のうちkt541とkt658の2つの系統は、温度感受性と優性の母性効果を示したことから、その原因遺伝子の同定は比較的に困難になった。現在、変異部位と密接に連鎖するDNAマーカーを同定するために、kt541変異体に対して多くの多型を持つ別系統の野生型ゼブラフィッシュを数世代にわたって交配することで、変異部位近傍以外が別系統に組み変わった集団を確立し、変異部位の遺伝学的マッピングを試みている。さらにnt1遺伝子の異所的発現が見られる他の5つの変異体系統について、表現型の解析を行ったところ、1系統は色素を作るメラノサイトの減少が観察され、4系統は頭部の中枢神経系での細胞死が見られ、いずれも胚性致死を示した。これら5系統では、前述の2系統と比べてnt1遺伝子の異所的発現が非常に弱く解析が難しい。このことはヘテロの母親由来の正常な遺伝子産物が卵に供給されていることによる可能性があると考えられたので、現在、変異をホモに持つ胚の始原生殖細胞を別個体に移植する実験を行っている。これによってホモ個体の致死性が回避され、正常な遺伝子産物を持たない卵を得られることが期待される。このような卵が得られた後は、それに由来する胚の表現型を解析する予定である。

Mesoembryonic induction is an essential phenomenon in vertebrate development. mesoderm induction time space specific origin, molecular structure, understanding The expression of the gene in the embryonic stage of the brain was determined by the expression of the gene in the embryonic stage of the brain. 2. The system of temperature sensitivity and maternal effect is difficult to identify and compare with the system of temperature sensitivity and maternal effect of temperature sensitivity. Now, different sites and closely linked DNA sequences are identified, kt541, and the wild type sequences of different sites and closely linked DNA sequences are identified. In addition, the occurrence of nt1 gene in 5 different systems was observed, and the analysis of phenotype was carried out; 1 system pigment in 5 different systems was observed, and the reduction of nt 1 gene in 5 different systems was observed; 4 system cell death in central nervous system of head was observed, and embryonic death was observed. The 5 systems are very difficult to resolve than the 2 systems mentioned above. This is the result of the investigation of the possibility of the transfer of embryos from primordial germ cells to individuals in the absence of a normal daughter product of maternal origin. It is hoped that the lethality of the bird will be avoided and normal genetic products will be available. The phenotype of the embryo was analyzed in advance.