初代培養ラット肝細胞を用いた天然由来抗酸化物質の多面的機能性の評価に関する研究

利用原代培养大鼠肝细胞评价天然抗氧化剂的多效功能研究

• 批准号: 16790013
• 负责人: 大川 雅史
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Fukuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790013/
• 关键词: 初代培養ラット肝細胞; 天然由来抗酸化物質; 多面的機能性の評価; comet assay; 構造-活性相関

化学発光法を用いた抗酸化活性測定法により各種生薬などのスクリーニングを行った。本化学発光法はキサンチン-キサンチンオキシダーゼ系にて生成するsuperoxide anion(O_2^-)をMPEC(発光試薬)にて捕捉し、その時の発光子を計測し評価する方法であり、従って、計測された光子数が少ないほど被験物質の抗酸化力が強いといえる。従来、catechin類、クロロゲン酸などは強い抗酸化活性を持っているとされ、今回はpositive controlとしてepigallocatechinを指標に比較検討を行った。まず抗酸化作用があるとされる生薬について検討した。その中でも比較的活性の強いものも見受けられたが、簡単な分画を行った場合、脂溶性の高いfractionにO_2^-の発生が認められるようなものも見受けられた。そこでgingerol類について測定を行うと明らかなO_2^-の発生が考えられ、化合物によってはpro-oxidantにもなりうることが示唆された。また、諸培養細胞を用い、活性酸素種を用い炎症を惹起する実験系の検討を行った。一定濃度に調整した天然化合物を培地に添加した状態で24hr培養した。その後、培地を交換するのと同時に0.1%H_2O_2になるように調整した培地を加え40min間、細胞を培養した。その後細胞へ傷害度を測定し保護作用を評価、プレート上に残った細胞はトリプシンを用い剥がし、comet assayを行う。現時点でH_2O_2を用いて酸化傷害を起こさせているが、効果の評価系に酸化還元反応を用いているので残存のH_2O_2の影響や測定する天然化合物自体の影響があり、評価系も再検討すべきと思われた。

Chemical 発 light を with い た acidification active resistance measurement に よ り various living 薬 な ど の ス ク リ ー ニ ン グ を line っ た. This chemical luminescence method キサ キサ チ チ キサ -キサ チ <e:1> キシダ キシダ ゼ ゼ ゼ is used to にて generate するsuperoxide Anion (O_2 ^ -) を MPEC (発 light try 薬) に て capture し, そ の when の 発 photon を measuring し review 価 す る method で あ り, 従 っ て, measuring さ れ た photon number less が な い ほ ど is の 験 material acidification resistance strong が い と い え る. 従 to, catechin, ク ロ ロ ゲ ン acid な ど は strong い を acidification efficacy with っ て い る と さ れ, today back to は positive control と し て epigallocatechin を indicators に comparison 検 line for を っ た. Youdaoplaceholder0 Antioxidant effect があるとされる biopharmaceuticals に まず て検 て検 for <s:1> た. In そ の で も compare the activity of strong の い も の も see the け ら れ た が, Jane 単 な points line drawing を っ た occasions, highly fat-soluble の い fraction に O_2 ^ - の 発 raw が recognize め ら れ る よ う な も の も see the け ら れ た. そ こ で gingerol class に つ い て measurement line を う と Ming ら か な O_2 ^ - の 発 raw が exam え ら れ, compound に よ っ て は pro - oxidant に も な り う る こ と が in stopping さ れ た. Youdaoplaceholder0, various cultured cells を use また, active acid strains を use また inflammation を causes する experimental system 検 attacks を conduct った. At a certain concentration に, adjust the <s:1> natural compound を, incubate the に, add the <s:1> た state で for 24 hours, and then cultivate the <s:1> た. そ の, cultivated land after を exchange す る の と meanwhile に 0.1% H_2O_2 に な る よ う に adjustment し た petty を between え 40 min, cell を culture し た. そ の へ after cell damage degree を し protection measurement を review 価, プ レ ー ト に on residual っ た cells は ト リ プ シ ン を with い peel が し, comet assay う を line. Now point で H_2O_2 を with い て acidification injury を こ さ せ て い る が, unseen fruit の review 価 に acidification and yuan against 応 を with い て い る の で residual の H_2O_2 の や measuring す る natural compounds of autologous の influence が あ り, review 価 も again beg す 検 べ き と think わ れ た.

项目成果

New Bisabolane-Type Sesquiterpenes from the Aerial Parts of Lippia dulcis.

• DOI: 10.1248/cpb.53.1175
• 发表时间: 2005-09
• 期刊: Chemical & pharmaceutical bulletin
• 影响因子: 1.7
• 作者: M. Ono;Hiroaki Morinaga;C. Masuoka;T. Ikeda;M. Okawa;J. Kinjo;T. Nohara