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酸化的ストレスの分子標的と個体レベルでの障害性発現機構に関する研究

个体水平氧化应激分子靶点及损伤表达机制研究

基本信息

批准号：
16790096
负责人：
長岡恵
金额：
$ 2.11万
依托单位：
National Institute of Health Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、酸化的ストレスの分子標的を個体レベルで明らかにする目的で、まずThioredoxin/Adult T cell derived factor (Trx/ADF)の過剰発現及び欠失動物での応答性を参照しつつ、Trx/ADFを指標として、生体レベルでの酸化的ストレスへの応答を追究し、この過程での金属イオンの役割をHPLC/HR-ICP-MS(微量元素の超高感度分析装置である二重収束型高分解能(HR)ICP-質量分析計)などを駆使して、明らかにするものである。HPLC/HR-ICP-MS法を用いることにより、分離された蛋白質に結合した微量元素をオンラインで検出することが可能となるが、このために不可欠なことは、測定金属に適したバックグラウンドレベルの低減化である。本年度はまずこれを実施した。さらに、同一タンパク質ながら金属の有無によって立体構造の異なるものについて分離条件の検討を行い、また、含有微量金属を指標に酸化ストレス消去系に関与する酵素等の変動を調べた。さらに、Trx/ADFはジスルフィド還元酵素であるため、硫黄(S)レベルでの検出も実施した。その結果、酸化ストレスに対して鋭敏に反応する臓器として知られる造血組織のホモジネート上清においては、低分子量の硫黄(S)含有化合物種の割合が他臓器のそれに比し、非常に高いことが明らかとなった。また、亜鉛(Zn)について、銅(Cu)とともにモニターしたところ、同じ保持時間に検出されるタンパク質(SOD)以外のタンパク質で、遺伝子過剰発現動物、欠失動物、正常動物においてZn結合量が異なっているタンパク質が見出された。この他Mnのピークも数本見られた。

In this study, individuals of acidified and acidified Thioredoxin/Adult T cell derived factor molecules were tested to understand their purpose, Thioredoxin/Adult T cell derived factor (Trx/ADF) was detected, and insufficient activity was detected in response to sexual reference, Trx/ADF, biochemistry, and so on. In the process of metal processing, the HPLC/HR-ICP-MS (trace element ultra-high sensitivity analysis device, double beam high decomposition energy (HR) ICP- analysis) is used to improve the performance of the metal. The HPLC/HR-ICP-MS method was used to determine the concentration of trace elements in the microelements, such as the concentration of trace elements, the This year, we will pay a lot of attention this year. In the same environment, there are three-dimensional separation conditions for separation conditions, including trace metals, such as acidizing, acidizing, digestion, digestion, enzyme and so on. The spores were isolated from Trx/ADF, Trx/ADF, and sulfur (S), respectively. The results showed that the high molecular weight sulfur (S) contained a variety of compounds in the hematopoietic tissue, the high molecular weight sulfur (S), the high molecular weight sulfur (S), the high molecular weight sulfur (S) and the high molecular weight thiosulfide (S). Check, Zn, Cu, check, save, live, live, lose, lose, I don't know how to Mn him. I don't know.