内因性自然免疫活性化分子を用いたDNAワクチンの免疫原性増幅法

使用内源性先天免疫激活分子的DNA疫苗的免疫原性扩增方法

• 批准号: 16790267
• 负责人: 武下 文彦
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790267/
• 关键词: DNAワクチン; アジュバント; 自然免疫; 遺伝子アジュバント

遺伝子アジュバントとして最適な分子を選択するため、Toll様受容体からのシグナル伝達に関わるアダプター分子の中で、MyD88はNF-κBを最も強く活性化し(無処置の細胞と比べて>55倍)、TRIFはIFN-βプロモーターを最も強く活性化すること(無処置の細胞と比べて>390倍)が判明し、この2つの分子を遺伝子アジュバントとして応用し、検討することとした。DNAワクチン用に開発されたpGAベクターにLacZ遺伝子を導入したpGA-LacZプラスミドを作製した。このプラスミドに、MyD88遺伝子を発現するカセットもしくはTRIFを発現するカセットを挿入し、pDX-LacZ-MyD88もしくはpDX-LacZ-TRIFを作製した。これらをBALB/cマウスに筋注エレクトロポレーション法で導入し、LacZに対する免疫応答を評価した。pDX-LacZ-MyD88ではpGA-LacZ投与群と比べ、7.8倍の抗原特異的抗体産生を誘導し、pDX-LacZ-TRIF投与群では、5.2倍の抗原特異的IFN-γ産生および有意に強力なCTL活性を誘導した。これらDNAワクチンの標的遺伝子をHAに交換し、pGA-HA、pDX-HA-TRIFを作製し、BALB/cマウスに投与後4LD_<50>のインフルエンザウイルス(H1N1)を経鼻感染させ、その後の生存率を評価した。感染後7日の生存率は、pGA-HA投与群では40%、pDX-HA-TRIF投与群では100%であった。このことにより、TRIFを遺伝子アジュバントとして用いることでDNAワクチンの免疫原性を増強し、ウイルス感染防御を増強したことが判明した。

MyD88 is the most active member of NF-κB in the molecular selection of Toll receptor. TRIF was found to be most active in IFN-β (>55-fold ratio in untreated cells) and more active in IFN-β (>390-fold ratio in untreated cells). DNA sequencing was developed using pGA-LacZ gene as a template. MyD88 gene expression, pDX-LacZ-TRIF expression, pDX-LacZ-TRIF expression BALB/C is the most important tool in the world. pDX-LacZ-MyD88 induced 7.8-fold antigen-specific antibody production compared to pGA-LacZ administration, and pDX-LacZ-TRIF induced 5.2-fold antigen-specific IFN-γ production compared to pGA-LacZ administration. The target gene of DNA was HA, pGA-HA, pDX-HA-TRIF, BALB/C, and <50>H1N1. The infection rate and survival rate were evaluated. The survival rate at 7 days after infection was 40% for pGA-HA and 100% for pDX-HA-TRIF. This is the first time that TRIF has been used to identify DNA that is more resistant to infection.

项目成果

内因性自然免疫活性化分子を利用した遺伝子アジュバント

使用内源性先天免疫激活分子的遗传佐剂

• 发表时间: 2005

CpG RNA: Identification of Novel Single-Stranded RNA That Stimulates Human CD14+CD11c+ Monocytes

• DOI: 10.4049/jimmunol.174.4.2273
• 发表时间: 2005-02
• 期刊: The Journal of Immunology
• 作者: T. Sugiyama;M. Gursel;F. Takeshita;C. Coban;J. Conover;T. Kaisho;S. Akira;D. Klinman;K. Ishii

Interleukin-1 receptor-associated kinase-1 plays an essential role for Toll-like receptor (TLR)7- and TLR9-mediated interferon-{alpha} induction.

• DOI: 10.1084/jem.20042372
• 发表时间: 2005-03-21
• 期刊: The Journal of experimental medicine
• 作者: Uematsu S;Sato S;Yamamoto M;Hirotani T;Kato H;Takeshita F;Matsuda M;Coban C;Ishii KJ;Kawai T;Takeuchi O;Akira S
• 通讯作者: Akira S

TRAF4 acts as a silencer in TLR-mediated signaling through the association with TRAF6 and TRIF

• DOI: 10.1002/eji.200526151
• 发表时间: 2005-08-01
• 期刊: EUROPEAN JOURNAL OF IMMUNOLOGY
• 影响因子: 5.4
• 作者: Takeshita, F;Ishii, KJ;Suzuki, K
• 通讯作者: Suzuki, K

Hyperproduction of IFN-γ by CpG Oligodeoxynucleotide-iduced exacerbation of atopic dermatitis-like skin lesion in some NC/Nga mice

CpG 寡脱氧核苷酸过量产生 IFN-γ 导致某些 NC/Nga 小鼠特应性皮炎样皮肤病变恶化

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Invest.Dermatol 125
• 作者: Kim Hyung-Ryong;et al.;Demachi-Okamura A.;Takakura M
• 通讯作者: Takakura M