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ES細胞からのリンパ管内皮細胞分化と腫瘍リンパ管特異的な標的分子の探索

ES细胞分化淋巴内皮细胞并寻找肿瘤淋巴管特异性靶分子

基本信息

批准号：
16790418
负责人：
高橋めい子
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790418/
关键词：
ES細胞血管新生リンパ管新生

项目摘要

ES細胞からリンパ管内皮細胞の分化誘導:LIFを除いてコラーゲンIV上でES細胞を分化誘導し、VEGFR2陽性の血管内皮前駆細胞をFACSにて採取した。それをコラーゲンあるいはOP9ストローマ細胞上で分化誘導した。VEGFR2陽性細胞をOP9ストローマ細胞上で3日間培養すると、prox1陽性、VEGFR-3陽性、podoplanin陽性、のLECに分化誘導された。この分化系を用いて、VEGF-Cとangiopoietin1がLEC文化に必須であるが、その他にOP9 stroma細胞に存在する膜タンパクが不可欠である事も証明した。また、Notch遺伝子の改変ES細胞を用いて、NotchのシグナルがLECを阻害することなど、新しい知見を得た。我々の結果は、ES細胞分化系によって、LECと静脈内皮細胞分化の詳細を明らかにするものであった。これらの成果は、現在論文にまとめて、投稿中である。リンパ管関連分子の機能解析:Podoplaninの細胞外ドメインにFcをつけたPodoplanin-Fcタンパクを作成した。これを用いてpodoplaninの未知のリガンドとの作用を阻止する。リンパ管内皮細胞あるいはがん細胞でのpodoplaninの機能を検討する。リンパ管内皮細胞の基礎研究:FACSに使える抗ヒト及びマウスpodoplanin抗体を作成した。これらを用いて、ヒトあるいはマウス腫瘍からがんリンパ管内皮細胞を分離する。正常部リンパ管内皮細胞との相違点をmicroarrayで解析する。

Differentiation of ES cells from vascular endothelial cells:LIF removal, VEGFR2-positive endothelial cells differentiation induction, FACS analysis The first step is to create a new environment. VEGFR-2 positive cells were cultured in OP9 cells for 3 days, prox-1 positive cells, VEGFR-3 positive cells, and LEC differentiation induced cells. This differentiation system is used to prove that VEGF-C and angiopoietin1 are essential for LEC culture and that other OP9 stroma cells exist. Notch gene and modified ES cells were used in the study. Notch gene and LEC were used in the study. The results showed that ES cells differentiated into LEC cells. The results of this paper are now published. Functional Analysis of the Related Molecules of Podoplanin: The Extracellular Function of Podoplanin The function of the podoplanin is unknown. The function of podoplanin in vascular endothelial cells is discussed. Basic research on vascular endothelial cells:FACS The endothelial cells were isolated from the blood vessels. The normal part of the vascular endothelial cells and the corresponding points were analyzed by microarray.