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アフリカツメガエルの胚を用いた膵島分化誘導因子の単離・輝定

利用非洲爪蟾胚胎分离和测定胰岛分化诱导因子

基本信息

批准号：
16790504
负责人：
坂信広
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Akita University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

膵幹細胞のマーカーと考えられる転写因子PDX-1の発現誘導が膵島への分化誘導において不可欠と考えられるが、PDX-1の発現調節機構に関しては殆ど明らかになっていない。従来より、内胚葉の誘導には中胚葉との相互作用が必要だと考えられていたが、近年アフリカツメガエルの将来内胚葉となる植物極外植片(vegetal explant)を中胚葉が誘導される前に単離し培養しても植物極外植片にPDX-1が誘導され、また背側に局在して誘導されることが示された。この結果は、植物極外植片にPDX-1発現誘導因子が内在することを示唆している。本研究では、すでに樹立しているPDX-1遺伝子のexon2のlocusにEGFP(enhapced green fluorescent protein)遺伝子(SA・IRES・EGFP・pA)をノックインしたES細胞株を用いた発現スクリーニング法により、PDX-1発現誘導因子のcDNAの単離・構造決定を行うことを目的とした。EGFP遺伝子をノックインしたES細胞株へのアフリカツメガエルの前方中内胚葉cDNAライブラリーの遺伝子導入後、蛍光マイクロプレートリーダーおよびEACS(fluorescence activated cell sorter)でEGFPが光るプールを見つけ、そのプールからsib-selection法、ES細胞からプラスミドを回収する方法により、PDX-1発現誘導因子のcDNAの単離を行い、PDX-1遺伝子の発現調節に重要な役割を果すと考えられる候補因子を同定した。

Stem cell differentiation is induced by PDX-1 gene expression, and PDX-1 gene expression is regulated by PDX-1 gene expression regulator. In recent years, the interaction between mesoderm and endoderm induction has been necessary. In recent years, the interaction between mesoderm and endoderm induction has been necessary. In recent years, the interaction between mesoderm and endoderm induction has been necessary. In recent years, the interaction between mesoderm induction and endoderm induction has been necessary. In recent years, the interaction between mesoderm induction and endoderm induction has been necessary. The results showed that PDX-1 gene expression induced by plant explants was very important. In this study, we established the PDX-1 gene exon2 locus EGFP(enhanced green fluorescent protein) gene (SA·IRES·EGFP·pA) and used it to develop ES cell lines. EGFP gene is introduced into ES cell lines and then transformed into EACS cells.(fluorescence activated cell sorter) EGFP light source detection, sib-selection method, ES cell light source detection method, PDX-1 gene expression inducer cDNA isolation, PDX-1 gene expression is regulated by the candidate factor.

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Expression of ABCA3, a causative gene for fatal surfactant deficiency, is up-regulated by glucocorticoids in lung alveolar type II cells

DOI：
10.1016/j.bbrc.2004.08.133
发表时间：
2004-10-15
期刊：
BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
影响因子：
3.1
作者：
Yoshida, I;Ban, N;Inagaki, N
通讯作者：
Inagaki, N

Human ABCA3, a product of a responsible gene for abca3 for fatal surfactant deficiency in newborns, exhibits unique ATP hydrolysis activity and generates intracellular multilamellar vesicles,

人类 ABCA3 是导致新生儿致命性表面活性剂缺乏的 abca3 基因的产物，表现出独特的 ATP 水解活性并产生细胞内多层囊泡，

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Biochem Biophys Res Commun, 324
影响因子：
0
作者：
Nagata;K.;Yamamoto;A.;Ban;N.;Tanaka;AR.;Matsuo;M.;Kioka;N.;Inagaki;N.;and Ueda;K.
通讯作者：
K.

Niemann-Pick type C disease: novel NPC1 mutations and characterization of the concomitant acid sphingomyelinase deficiency.

DOI：
10.1016/j.ymgme.2005.07.025
发表时间：
2006-02
期刊：
Molecular genetics and metabolism
影响因子：
3.8
作者：
Hiroaki Tamura;Tsutomu Takahashi;N. Ban;Hiroyuki Torisu;H. Ninomiya;G. Takada;N. Inagaki
通讯作者：
Hiroaki Tamura;Tsutomu Takahashi;N. Ban;Hiroyuki Torisu;H. Ninomiya;G. Takada;N. Inagaki

Cloning of ABCA17, a novel rodent sperm-specific ABC (ATP-binding cassette) transporter that regulates intracellular lipid metabolism