慢性骨髄性白血病におけるインターフェロン誘導転写因子複合体の発現制御機構の解析

[ICSBP,PU.1の相互作用の解析]我々は、慢性骨髄性白血病(CML)細胞株がインターフェロン刺激により、蛋白レベルでICSBP,PU,1が相乗的にBCL-2の発現を抑制しアポトーシスを誘導することを発見した。また、ICSBP,PU.1遺伝子を慢性骨髄性白血病細胞株KT-1細胞に導入した際に、細胞増殖抑制能が相乗的に発揮されることを見いだした。BCL2プロモータを用いたトランスフェクションアッセイではICSBとPU.1が相乗的にBCL-2プロモーターの転写活性を抑制することを確認し、この現象はKT-1細胞のみならずIFNに対して難反応であるK562細胞でも同様に観察された。BCL-2プロモーター解析についてはICSBPの結合をゲルシフト法で確認し得たが、PU.1については明らかな結合は確認できなかった。トランスフェクションアッセイ,IPウエスタンブロット法でも両者が会合することがわかっており、今後は癌抑制遺伝子でもあるPU.1発現抑制機構をさらに詳しく追求する必要があると考えられる。我々の検討ではPU.1単独でもCML細胞株の増殖が抑制されることを証明しており、癌抑制遺伝子であるPU.1発現抑制がCMLの増殖に重要な役割を果たしている可能は極めて高いと思われる。これらの解明はCMLの分子標的治療を推進する上で必須の課題であると考えられる。[患者検体による検討]我々の研究は主としてin vitroで施行したが、文書同意に基づいて採取したCML患者の骨髄細胞をもちいた臨床研究でも、IFNが有効であった症例ではBCL-2の発現が低下し、無効であった症例ではBCL-2の発現に変化がみられず、これらの事実はin vitroの研究成果を臨床検体で実証することができた。

[ICSBP,PU.1の相互作用の解析]我々は、慢性骨髄性白血病(CML)細胞株がインターフェロン刺激により、蛋白レベルでICSBP,PU,1が相乗的にBCL-2の発現を抑制しアポトーシスを誘導することを発見した。また、ICSBP,PU.1遺伝子を慢性骨髄性白血病細胞株KT-1細胞に導入した際に、細胞増殖抑制能が相乗的に発揮されることを見いだした。BCL2プロモータを用いたトランスフェクションアッセイではICSBとPU.1が相乗的にBCL-2プロモーターの転写活性を抑制することを確認し、この現象はKT-1細胞のみならずIFNに対して難反応であるK562細胞でも同様に観察された。BCL-2プロモーター解析についてはICSBPの結合をゲルシフト法で確認し得たが、PU.1については明らかな結合は確認できなかった。トランスフェクションアッセイ,IPウエスタンブロット法でも両者が会合することがわかっており、今後は癌抑制遺伝子でもあるPU.1発現抑制機構をさらに詳しく追求する必要があると考えられる。我々の検討ではPU.1単独でもCML細胞株の増殖が抑制されることを証明しており、癌抑制遺伝子であるPU.1発現抑制がCMLの増殖に重要な役割を果たしている可能は極めて高いと思われる。これらの解明はCMLの分子標的治療を推進する上で必須の課題であると考えられる。[患者検体による検討]我々の研究は主としてin vitroで施行したが、文書同意に基づいて採取したCML患者の骨髄細胞をもちいた臨床研究でも、IFNが有効であった症例ではBCL-2の発現が低下し、無効であった症例ではBCL-2の発現に変化がみられず、これらの事実はin vitroの研究成果を臨床検体で実証することができた。