抗酸化物質としての母乳の役割

母乳作为抗氧化剂的作用

• 批准号: 16790592
• 负责人: 東海林 宏道
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790592/
• 关键词: 抗酸化作用; 母乳; heat shock protein; スペルミン

【目的】Heat shock protein(HSP)は様々なストレスにより産生が誘導され、細胞を保護する機能を担っており、抗酸化作用を有するとされる。我々は過去の本学会において、母乳もしくは母乳中の生理活性物質の一つであるポリアミン(スペルミン:SPM)が消化管上皮において抗酸化作用を発揮していることを報告した。今回、母乳やSPMの持つ抗酸化作用の機序にHSPの誘導が関与しているとの仮説に基づき、消化管上皮細胞がHSPを産生し抗酸化作用を発揮するか、さらに母乳もしくはSPMによる前処理によって細胞内にHSPの一つであるHSP72が誘導されるか否かを培養細胞を用いて検討した。【方法】(実験1)ラット小腸上皮由来IEC-6細胞をconfluentまで培養後、day4にheat shock(43℃、60分)処理を施し、day5に0.25mMの過酸化水素を30分間作用させ、生存細胞の割合をneutral red uptake法により評価した。(実験2)day4にheat shock処理、もしくは無血清培地+母乳(100倍希釈除脂肪処理)及び5μM SPMで24時間前処理をしたIEC-6綱胞内のHSP72発現の有無をWestern Blot法にて検討した。【結果】(実験1)Heat shock処理を施したIEC-6細胞(69.0%)では無処理の対照(47.0%)に比べ過酸化水素負荷後の生存細胞が有意に多かった。(実験2)Heat shock処理をしたIEC-6細胞にHSP72の発現を認めたが、母乳または5μM SPMによる前処理では細胞内にHSP72の発現を認めなかった。【結語】Heat shockによりIEC-6細胞内にHSP72が誘導され、抗酸化作用を発揮することが示唆された。しかし、母乳やSPMが消化管上皮細胞においてHSP72を誘導するという事実は確認できなかった。

[Objective] Heat shock protein(HSP) plays an important role in induction and cell protection. In the past, we have reported on the development of physiologically active substances in breast milk (SPM) and digestive tract epithelium. In this paper, the mechanism of HSP induction in human breast milk and SPM is discussed. The mechanism of HSP induction in human breast milk and SPM is discussed. The mechanism of HSP production in digestive epithelial cells and the mechanism of HSP induction in human breast milk and SPM is discussed. [Methods](Step 1) Small intestinal epithelium derived from IEC-6 cells was cultured in confluent medium, treated with heat shock(43℃, 60 min) on day4, and treated with 0.25 mM peracidified water for 30 min on day5. The cleavage of viable cells was evaluated by neutral red uptake method. The presence or absence of HSP72 in IEC-6 cells was detected by Western Blot after 4 days of heat shock treatment, serum-free culture + breast milk (100-fold fat removal treatment) and 5μM SPM treatment for 24 hours. [Results](1) IEC-6 cells treated with Heat shock (69.0%) and untreated cells (47.0%) were significantly more susceptible to heat shock than those under acidified water stress. (2) The expression of HSP72 in IEC-6 cells treated with Heat shock and 5μM SPM pretreatment with breast milk was detected. [Conclusion] Heat shock induced HSP72 induction and anti-acidification in IEC-6 cells. HSP72 was induced in the epithelial cells of digestive tract in human breast milk.