サイトカイン/サイトカイン受容体のシェダーゼを標的とした新しい皮膚老化防止戦略

一种针对细胞因子/细胞因子受体脱落酶的新型皮肤抗衰老策略

• 批准号: 16790647
• 负责人: 室田 浩之
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790647/
• 关键词: 光老化; TNF; TNFRp55; シェディング; TACE; ケラチノサイト; JNK; UVB; 線維芽細胞; UVA

【目的】表皮細胞表面のTNFRp55を標的とした光老化防止戦略の確立を目標とする。TNFRp55はTNF Activating Converting Enzyme(TACE/ADAM17)によって切断され可溶型TNFRp55(sTNFRp55)になる。このsTNFRp55はTNFの効果を中和する事より、TACEを活性化することで光老化が防止できるか検討した。【方法】TACEは4-aminophenylmercuric acetate(APMA)によって特異的に活性化される。今回我々はAPMA付加がHaCaT・normal human epidermal keratinocyte(NHEK)に及ぼす効果を調べた。また、UVB180mJ/cm^2を隔日で6日間照射したSKHマウス(光老化モデルマウス)にAPMA200mMを照射6時間前に外用することによりマウスの光老化を予防できるかを生化学・分子生物学・病理組織学的に検討した。【結果】HaCaTおよびNHEKにUVB(0〜10mJ/cm2)を照射すると培養上澄中に含まれるsTNFRp55はUVB照射量依存的に減少するが、APMA200mMで刺激した培養上清中sTNFRp55量はUVB照射量依存的に上昇した。免疫蛍光染色およびFACSの検討でもAPMA処理した細胞内外のTNFRp55が減少していた。さらにAPMAはUVB照射(20mJ/cm^2)によるHaCaTのJNKのリン酸化を抑制することができた。APMA200mMを塗布したSKHマウスではUVB照射に伴う膠原線維の菲薄化が抑制される傾向が認められ、皮膚のwhole lysateを用いたザイモグラムではAPMA塗布したマウスの皮膚では紫外線照射によるMMPsの活性が抑制されていた。【結論】APMAは皮膚光老化を防止できる潜在能力があると考える。

[Objective] TNFRp55 on the surface of epidermal cells is a target for photoaging prevention. TNFRp55 is a TNF Activating Converting Enzyme(TACE/ADAM17) that cuts off soluble TNFRp55 (sTNFRp55). TNFRp55 neutralizes TNF effects, activates TACE, and prevents photoaging. [Methods] TACE was activated by 4-aminophenylmercuric acetate(APMA). This time, we have to pay attention to HaCaT·normal human epidermal keratinocyte(NHEK) and its effect. UVB180mJ/cm^2 every other day for 6 days for SKH (photoaging) APMA200mM for 6 hours for external use for prevention of photoaging in biochemistry, molecular biology and pathology. [Results] Under UVB irradiation (0 ~ 10mJ/cm2), the concentration of sTNFRp55 in culture supernatant decreased in a dose-dependent manner. Under APMA200mM, the concentration of sTNFRp55 in culture supernatant increased in a dose-dependent manner. Immunohistochemical staining and FACS analysis showed that TNFRp55 in and out of cells decreased after APMA treatment. In addition, APMA suppresses UVB radiation (20mJ/cm^2) and the acidification of HCaT and JNK. APMA200mM coating of SKH inhibits collagen thinning in response to UVB irradiation, and inhibits MMPs activity in response to UVB irradiation of skin with whole lysate. [Conclusion] APMA can prevent skin photoaging.