权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

細胞内シグナル応答型新規遺伝子送達システムの開発

开发响应细胞内信号的新型基因传递系统

基本信息

批准号：
05J06068
负责人：
河村健司
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

第一に、細胞内カスパーゼ3シグナルに応答する遺伝子キャリアとして設計したCPCCtatに関して、主鎖骨格や側鎖ペプチド配列を変更し、このことが遺伝子発現制御に与える影響を無細胞系発現実験により評価した。その結果、合成した各キャリア分子においてカスパーゼシグナルに応答した遺伝子発現の活性化が確認され、本研究の概念に基づくキャリアはフレキシブルな分子設計が可能であることが明らかとなった。また、この成果をJournal of Drug Targetingに報告した。第二に、治療を指向した戦略として、カスパーゼ3より上流の細胞内シグナルであるカスパーゼ8に応答するCPCCtat-8の合成、及び治療用遺伝子としてアポトーシスを抑制するbcl-2をコードしたプラスミドDNAを利用した。酵素反応による側鎖ペプチド切断実験の結果、CPCCtat-8はカスパーゼ8だけでなくカスパーゼ3にも応答することが明らかとなり、肝炎や神経変性疾患をより早い段階で治療できるキャリア分子として利用できる。また、強力な遺伝子発現を誘導するCMVプロモーターを有するプラスミドにbcl-2を組み込むことにより、in vivoで利用できる治療用遺伝子pcDNA3-bcl-2を作成した。さらに、この遺伝子を利用したアポトーシス抑制の評価としてcell viability assayによる評価系を構築し、治療モデル系の基礎を築いた。最後に、本研究の概念を感染症治療に応用するためのモデル系としてHIV-1感染細胞で活性化しているHIV-1プロテアーゼに応答する新規キャリア分子AGAGtatを設計した。無細胞系遺伝子発現実験の結果、AGAGtatはHIV-1プロテアーゼにより側鎖ペプチドが切断されることで遺伝子発現を活性化することが可能であり、本概念が感染症治療においても有用な治療法となり得る事を示した。

First, the intracellular cell culture system is designed to control the development of cell lines without the influence of cell culture system development. The results of this study confirm that molecular design is possible based on the concept of molecular design. The Journal of Drug Targeting reports the results. Second, the therapeutic direction is to synthesize CPCCtat-8 in the upstream intracellular system, and to utilize bcl-2 in the upstream intracellular system. The enzyme reaction is blocked by the side lock, and the CPCCtat-8 is blocked by the side lock. The CPCCtat-8 is blocked by the side lock. The expression of CMV protein is induced by the presence of bcl-2 in vivo and the use of pcDNA3-bcl-2 as a therapeutic protein. In addition, the evaluation of cell viability assay and the foundation of treatment system were established. Finally, the concept of this study is to design new molecules for the treatment of infectious diseases such as HIV-1 infection, HIV-1 activation and HIV-1 response. As a result of cell line gene discovery, AGAGtat is able to activate HIV-1 gene discovery by blocking it, and this concept is useful in the treatment of infectious diseases.