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スライス培養を用いて網膜前駆細胞の運命決定機構と視細胞の配置パターンを探査する。

利用切片培养探讨视网膜祖细胞的命运决定机制和感光细胞的排列模式。

基本信息

批准号：
05J07851
负责人：
田崎加奈子 (斉藤加奈子 / 齋藤加奈子)
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

1)前駆紳胞が二つの娘先駆細胞を生ずる分裂を行なった時、娘前駆細胞間でエレベーター運動の軌跡が異なるということに気付いたが、この軌跡の違い、特に軌跡が水平となるS期の高さが異なることが、細胞運命決定に影響するかどうかを調べたい。何故ならば、網膜組織においてbasal面に位置する視神経細胞がShhを発現していることが知られており、前駆細胞がG1期中あるいはDNA合成中にShhに曝露されるレベルがエレベーター運動の軌跡に応じて異なるという可能性がある。そこで、これらが、細胞運命決定に影響するかどうかを調べるため、各々の前駆細胞のエレベーター運動の軌跡が水平となった時(S期)、細胞体のapical面とbasal面からの各々の距離、及びその位置に停滞していた時間を記録する。その後、当該前駆細胞がapical面で分裂して生じた娘細胞のタイプを免疫染色的に同定する。しかし、分裂後数時間で発現する分子マーカーは極めて少なく、また、分裂前から前駆細胞が次にどのような細胞を生ずるのかなどを判断する事は困難である。しかし、ニューロンを生ずる分裂を行う前駆細胞を同定することのできる『Tis21ノックインマウス』を用い実験を行なった。培養しながら前駆細胞の挙動を観察する事が可能になる。また、他の候補因子も探査して行きたい。2)ある種の孫娘細胞ペアがbasal側へと移動することなくapical付近で停滞し続けるのを観察した。もしapical面付近を最終配置場所とする視細胞であると判明すれば「視細胞は誕生位置にそのまま配置されてニューロン層の一部を構成する」と言える(仮説1)。一方、「水平細胞はいったんbasal側に動いた後にapical側へ戻る」という最近の報告があり、視細胞にもそうした動きがあるのかもしれない(仮説2)。こうした点について注目して視細胞の移動軌跡・配置パターンを解明する。

1) at the time of the birth of the mother, the Why is it that the network organization is responsible for the location of the basal and that the Shh is aware that the Shh synthesis of the previous cell in the G1 phase reveals that there are significant changes in the Shh synthesis of the network? The number of computers, the number of cells, and the number of cells determine the level of response (S), the location of the cell, the location of the cell, and the location of the cell, and the location of the cell is stagnant, and the location of the cell is stagnant. After treatment, the apical cells were divided, the mother cells were divided, and the immunostaining was confirmed by immunostaining. During the period of time after the split, it was found that there was a lot of trouble in the determination of the number of people who were in trouble during the period of time after the split and after the split. The cell before the split line is the same as the one before the split line. It may be difficult to find out if there is a problem in the pre-training program. He