電磁泳動力を利用する新規な細胞表面分析法と細胞分離法の発明

发明新的细胞表面分析方法和利用电泳力的细胞分离方法

• 批准号: 05J09600
• 负责人: 飯国 良規
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J09600/
• 关键词: 電磁泳動; 単一相互作用力; 解離速度定数; 細胞; 糖鎖; レクチン; 酵母細胞; マンノース; コンカババリン A; 相互作用力

本研究では磁場と電流を駆動力とする電磁泳動力に注目し、強い電磁泳動力を得るために超伝導磁石(10T)を用いた電磁泳動力を利用する微粒子の吸着力測定法を開発した岩本法の発展として細胞表面の分子認識、凝集等の主要因子のひとつである精-タンパク質(レクチン)相互作用の本法による測定を行った。本法はキャピラリー壁に吸着した微粒子を、電流を次第に増加させたときの電磁泳動力により脱着させ、その脱着電流から脱着に要した力(吸着力)を測定する方法である。試料としては細胞表面にマンノース(Man)含有糖鎖を持つ酵母細胞とMan結合レクチンであるConA、GNL、HHLおよびNPLを用いた。これらのレクチンを内寸100μmx100μmのシリカキャピラリー内壁に固定し、このレクチン修飾表面に対する酵母細胞の吸着力を0-60pNの範囲で測定した。ConA、GNL、HHLおよびNPL修飾表面に対する吸着力を測定した結果、酵母細胞表面Man糖鎖とConA、GNL、HHLおよびNPLとの単一相互作用力はそれぞれ41pN、10pN、8pNおよび11pNと得られた。さらに、酵母細胞に対して一定の電磁泳動力を印加時の時間に対する酵母細胞の脱着数を測定し、これをBellモデルによりフィッティングし、Man-レクチン相互作用の解離速度定数を求めた。得られたConA、GNL、HHLおよびNPLの解離速度定数はそれぞれ4.5×10^<-3>s^<-1>、2.7×10^<-2>s^<-1>、3.5×10^<-2>s^<-1>および2.2×10^<-3>s^<-1>であった。これらの解離速度定数は相互作用力が大きいほど小さくなる傾向が得られた。以上のように本法により細胞表面での分子間の相互作用力が測定され、pNオーダーの相互作用力の違いにより分子認識が可能であることから、細胞表面分析法としての可能性が示された。

In this study, the magnetic field and electric current, the electromagnetic power, and the electromagnetic power are the focus of attention. The strong electromagnetic power is obtained by using the super magnet (10T). The electromagnetic power is used to utilize the adsorption force of fine particles. The determination method is based on the main factors such as molecular recognition and agglutination on the cell surface. This method is used to measure を行った based on the interaction between ひとつである精-タンパク性(レクチン). This method uses the power of electromagnetic phoresis to absorb fine particles on the wall and increase the current level.により出させ, その取电 から にら に要したforce (adsorption force) をMeasurement する method である. The sample としては cell surface にマンノース (Man) contains sugar-locked yeast cells とMan combined with レクチンであるConA, GNL, HHL およびNPL をいた.これらのレクチンをInner size 100μmx100μmのシリカキャピラリーinner wall fixed , このレクチン modified surface に対する yeast cells の adsorption force 0-60pN の range 囲 し た. ConA, GNL, HHL NPL modified surface adsorption force measurement results, yeast cell surface Man sugar lock ConA , GNL, HHL およびNPL との単一 interaction force はそれぞれ41pN, 10pN, 8pN および11pN と得られた.さらに、Yeast cell に対してdetermined electromagnetic phoresis power をprinting time のtime に対するYeast cells のdetached number をmeasurementし、これをBellモデルによりフィッティングし, Man-レクチンinteraction のdissociation rate definite number をめた. Obtain the dissociation speed constant of られたConA, GNL, HHLおよびNPLはそれぞれ4.5×10^<-3>s^<-1>, 2.7× 10^<-2>s^<-1>, 3.5×10^<-2>s^<-1>および2.2×10^<-3>s^<-1>であった.これらのThe dissociation speed is fixed, the interaction force is large, and the small さくなる tendency is obtained. The above のように本法 is used to measure the interaction force between molecules on the cell surface and pN オーダーのinteraction Molecular recognition is possible, and cell surface analysis is possible.

项目成果

Electromagnetophoretic Force Measurement of a Single Binding Interaction between Lectin and Yeast Cell Surfaces

凝集素和酵母细胞表面之间单结合相互作用的电磁泳力测量

• 发表时间: 2007
• 期刊: Analytical Sciences 23(1)
• 作者: Saijoh Y;Oki S;Tanaka C;Nakamur T;Adachi H;Yan YT;Shen MM;Hamada H;Kenji Fukui et al.;Yasumasa Mitani et al.;Osamu Tsukamoto;Yasunori Shintani;Hidetoshi Okazaki;Masashi Fujita;Masakatsu Wakeno;Osamu Tsukamoto;Yoneshima H;Yamamoto N;Toshiki Yabe;Toshiki Yabe;土屋裕子;土屋裕子;土屋裕子;Terukazu Nogi;飯国良規
• 通讯作者: 飯国良規

Electromagnetophoretic Measurements of Adsorption Force Polystyrene Microparticles on Silica Surfaces in Surfactant Solutions

表面活性剂溶液中二氧化硅表面聚苯乙烯微粒吸附力的电磁泳测量

• 发表时间: 2006
• 期刊: Bulletin of the chemical Society of Japan 79
• 作者: Saijoh Y;Oki S;Tanaka C;Nakamur T;Adachi H;Yan YT;Shen MM;Hamada H;Kenji Fukui et al.;Yasumasa Mitani et al.;Osamu Tsukamoto;Yasunori Shintani;Hidetoshi Okazaki;Masashi Fujita;Masakatsu Wakeno;Osamu Tsukamoto;Yoneshima H;Yamamoto N;Toshiki Yabe;Toshiki Yabe;土屋裕子;土屋裕子;土屋裕子;Terukazu Nogi;飯国良規;飯国良規
• 通讯作者: 飯国良規