核内レセプターを用いた新規染色体構造変換制御因子の機能解析

使用核受体对新型染色体结构转化调节因子进行功能分析

• 批准号: 05J11500
• 负责人: 伊藤 紗弥
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J11500/
• 关键词: 核内レセプター; 遺伝子発現制御; 転写共役因子; 染色体構造変換; ショウジョウバエ

遺伝子発現制御を担う転写段階は、染色体構造変換制御因子を含む転写共役因子複合体群による制御を介した染色体構造変換を伴い進行する。本研究の目的は、遺伝子発現機構を理解する上で染色体構造変換に目し、転写段における染色体構造変換因子の機能析を成し遂げることである。これまで、転写開始及び転写終結がヒストン修飾及びクロマチンリモデリング因子群による染色体構造変換を介して制御される機構が明らかにされつつある。生体内での組織特異的な遺伝子発現はこれら複合体群による染色体構造変換能により規定されると考えられ、複合体の特異性を決定する更なる染色体構造変換複合体構成因子の解析は必須であると考えられる。申請者はこれまでショウジョウバエ個体において核内レセプターの転写活性を指標とした分子遺伝学的スクリーニングを行い、染色体構造変換を担う新規因子の単離・同定を行った。その結果、転写活性を抑制し副腎特異的に発現する未知因子の単離に成功した。そこで本研究は、同定した新規因子の機能解析を試みることとした。本研究のこれまでの成果として、同定した新規因子を介した転写抑制機構を明確にしたことが挙げられる。新規因子は細胞核内において転写抑制化の指標となる9番目のリジン残基がメチル化されたヒストンH3と局在を共にすることから、ヒストン修飾を介した転写抑制化機構が示唆された。また、培養細胞を用いて、この新規因子がピストンH3の9番目のリジン残基を特異的に認識・結合するヘテロクロマチン化誘導因子HP1と会合することを見出した。さらに、BAHD1のHP1との結合はHP1サブタイプのうちHP1γ選択的、かつリン酸化されたHP1γに特異的であることが示された。これまで、リン酸化型HP1γは転写伸長制御に関与することが明らかにされており、BAHD1が転写伸長の場で抑制制御を担う可能性が示唆された。現在、BAHD1の転写伸長抑制能をin vitro系で解析するとともに、BAHD1-HP1を介した転写抑制機構を担う複合体の活性本体を同定するため培養細胞からのタンパク複合体精製を行っている。さらに、個体レベルでの生理機能を解明するため、新規因子のノックアウトマウスの作成を試みている。

Posthumous son 伝 発 now suppression を bear う planning write Duan Jie は, chromosome structure variations in system contains royal factor を む factor complex group planning to write a total service に よ る suppression を interface し た chromosome structural variations in を companion to す い る. Purpose の this study は, but 伝 発 institutions now を understand す る で on chromosome structural variations in に し, planning and writing section に お け る chromosome structural variations in factor の function analysis を into し hence げ る こ と で あ る. こ れ ま で, planning to write started and び planning to write an end が ヒ ス ト ン modifications and び ク ロ マ チ ン リ モ デ リ ン グ factor group に よ る chromosome structural variations in を interface し て suppression さ れ る institutions が Ming ら か に さ れ つ つ あ る. Born in vivo で の な of tissue specific 伝 son 発 now は こ れ ら complex group of に よ る chromosome structural variations in can に よ り rules さ れ る と exam え ら れ, complex の specificity を decided す る more な る chromosome structural variations in complex form factor analytical は の must で あ る と exam え ら れ る. Applicants は こ れ ま で シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ individual に お い て in nuclei レ セ プ タ ー の を planning write activity index と し た molecules but 伝 learn ス ク リ ー ニ ン グ を line い, chromosome structure variations in を bear う new rules factor の 単 leaves, with fixed line を っ た. The そ <s:1> results showed that the 転 activity を inhibited the に occurrence する unknown factor specific to the <s:1> adrenal gland, and the 単 単 successfully separated from the に た. Youdaoplaceholder0 で で で in this study, the <s:1> function analysis of the <s:1> new rule factors of the same determination を experiment みる とと とと た た た た Achievements of this study の こ れ ま で の と し て, with fixed し た new rules factor を interface し た planning write inhibit institutions を clear に し た こ と が 挙 げ ら れ る. New rules factor は nuclei に お い て planning write inhibit mineralization の index と な る 9 times eye の リ ジ ン residues が メ チ ル change さ れ た ヒ ス ト ン H3 と bureau in を に す る こ と か ら, ヒ ス ト ン modified を interface し た planning write inhibit the agency が in stopping さ れ た. ま た, cultivating cells を using い て, こ の new rules factor が ピ ス ト ン H3 の 9 times eye の リ ジ ン residues を specific に understanding, combined with す る ヘ テ ロ ク ロ マ チ ン change factor HP1 meet と す る こ と を shows し た. さ ら に, BAHD1 の HP1 と の combining は HP1 サ ブ タ イ プ の う ち HP1 gamma sentaku, か つ リ ン acidification さ れ た HP1 gamma に specific で あ る こ と が shown さ れ た. Type こ れ ま で, リ ン acidification HP1 gamma は planning write elongation suppression に masato and す る こ と が Ming ら か に さ れ て お り, BAHD1 が planning write で inhibit elongation の field suppression を bear が う possibility in stopping さ れ た. Now, BAHD1 の planning write elongation can を in vitro is で す analytical る と と も に, BAHD1 HP1 を interface し た planning write are activated to restrain activity of institutions を bear う complex の ontology を with fixed す る た め culture cell か ら の タ ン パ ク complex line of refined を っ て い る. さ ら に, individual レ ベ ル で の physiology を interpret す る た め, new rules factor の ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス の done try を み て い る.