アフリカツメガエル胚の初期発生におけるアクチビン応答遺伝子の探索と解析

非洲爪蟾胚胎早期发育中激活素反应基因的搜索与分析

• 批准号: 05J11586
• 负责人: 本間 幹啓
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J11586/
• 关键词: アクチビン; BENI; 原腸陥入運動; Xbrachyury; 核移行シグナル; BENI(未発表)

様々な濃度のアクチビンAを中期胞胚(ステージ8.5)から切り出したアニマルキャップに添加し、処理後早期に、経時的にmRNAを抽出した。マイクロアレイでmRNA量を定量的に解析し、発現量が変化する新規遺伝子BENIを特定した。BLASTP検索の結果、相同なアミノ酸配列が近縁種トロピカリスだけでなく、ヒト、マウス、ラット、ミドリフグでも見出された。いずれも、機能に関する報告はなかった。RT-PCRによって調べた結果、BENIは未受精卵から尾芽胚期(ステージ34)まで発現していた。また、ホールマウントin situハイブリダイゼーションによって調べた結果、原腸胚では表皮全体に発現していた。BENI mRNAの過剰発現による機能獲得実験やアンチセンスモルフォリノ(BENI-MO)を使った機能阻害実験を行った結果、胚の体軸が屈曲する表現型を示した。アクチビンの誘導作用によるアニマルキャップの伸長に対するBENIの影響を調べたところ、BENI mRNAの過剰発現により伸長は阻害され、BENI-MOでは伸長は促進された。これらの結果はBENIが原腸陥入運動に関与していることを示唆している。初期中胚葉遺伝子の発現に対する影響を調べたところ、BENI mRNAの過剰発現によって汎中胚葉マーカーであるXbrachyuryの発現が抑制された。内中胚葉マーカーMix. 1や背側中胚葉マーカーであるgoosecoidおよびchordinの発現は変化しなかった。BENIアミノ酸配列にはN末端側およびC末端側それぞれに推定核移行シグナルが存在した。蛍光タンパク質EGFPとの融合タンパク質をコードする遺伝子を作製し、そのmRNAを微量:注入して細胞内局在を観察した結果、BENI-EGFPタンパク質は核に局在した。核移行シグナルを欠失したBEM-ΔNLS-EGFPタンパク質は細胞全体で観察された。

様々なconcentrationのアクチビンAをmid-stage embryo (ステージ8.5)から Cutり出したThe addition of アニマルキャップに, the early stage after treatment, and the extraction of mRNA at the end of the period.マイクロアレイでmRNA quantity を quantitative analysis し, 発现quantification が変化 する新睝子BENIをspecific した. BLASTP search results, the same なアミノacid sequence がNearly species トロピカリスだけでなく,ヒト,マウス,ラット,ミドリフグでも见出された.いずれも、functional に关する report はなかった. The result of RT-PCR is that the unfertilized egg is in the tail bud embryo stage (34) and the result is that the result is the same.また、ホールマウントin The results of the situ ハイブリダイゼーションによって Adjustment, gastrula では epidermal overall していた. BENI The function of the mRNA is obtained through the expression of the function of the mRNA (BENI- The MO) function hinders the movement of the embryo and results in buckling of the body axis of the embryo, indicating the phenotype. BENI's induction effect, BENI's influence The expression of "mRNA" is that it hinders its elongation, and BENI-MO's elongation is "promoted". The result of これらのはBENIがgastache enters the movement and the していることをshows the instigation している. Initial mesodermal remnants of early stage mesoderm are affected by the influence of early stage mesoderm remnants, BENI The expression of mRNA の 牰発appears に よ っ て pan mesoderm マ ー カ ー で あ るInner mesoderm マーカーMix. 1やdorsal mesoderm マーカーであるgoosecoidおよびchordinの発成は変化しなかった. BENI アミノ acid ligation にはN-terminal side およびC-terminal side それぞれにIt is presumed that nuclear migration シグナルが exists.荍光タンパク色EGFPとのfusionタンパク色をコードする伝子を产し、そのmRNAをMicro-amount: Inject into the cells and observe the results. BENI-EGFP is in the cytoplasm and nucleus. Nuclear migration was detected and the whole cell was inspected for BEM-ΔNLS-EGFP.

项目成果

ツメガエル原腸陥入時のSDF-1/CXCR4の作用について

SDF-1/CXCR4 在非洲爪蟾原肠胚形成过程中的作用

• 发表时间: 2005
• 期刊: 日本発生生物学会 第38回大会 大会プログラム
• 作者: 福井 彰雅;北本 淳子;本間 幹啓;浅島 誠
• 通讯作者: 浅島 誠

SDF-1 alpha regulates mesendodermal cell migration during frog gastrulation.

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biochemical and biophysical research communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: A. Fukui;Toshiyasu Goto;J. Kitamoto;M. Homma;M. Asashima

特許

专利

• 发表时间: 2008

A novel gene, BENI is required for the convergent extension during Xenopus laevis gastrulation.

非洲爪蟾原肠胚形成期间的会聚延伸需要一种新基因 BENI。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Developmental Biology 303・1
• 作者: Narikawa;R.;et al.;Satoshi Sekiguchi;Satoshi Sekiguchi;Satoshi Sekiguchi;Kwon Jungkee;Kwon Jungkee;Motohiro Homma
• 通讯作者: Motohiro Homma

脊椎動物の初期発生における中胚葉形成を支配する新規遺伝子Brachyury Expression by Nuclear Inhibitor, BENI

Brachyury 表达，一种在早期脊椎动物发育过程中控制中胚层形成的新基因，由核抑制剂 BENI 开发