アフリカツメガエル胚の初期発生におけるアクチビン応答遺伝子の探索と解析

非洲爪蟾胚胎早期发育中激活素反应基因的搜索与分析

• 批准号: 05J11586
• 负责人: 本間 幹啓
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J11586/
• 关键词: アクチビン; BENI; 原腸陥入運動; Xbrachyury; 核移行シグナル; BENI(未発表)

様々な濃度のアクチビンAを中期胞胚(ステージ8.5)から切り出したアニマルキャップに添加し、処理後早期に、経時的にmRNAを抽出した。マイクロアレイでmRNA量を定量的に解析し、発現量が変化する新規遺伝子BENIを特定した。BLASTP検索の結果、相同なアミノ酸配列が近縁種トロピカリスだけでなく、ヒト、マウス、ラット、ミドリフグでも見出された。いずれも、機能に関する報告はなかった。RT-PCRによって調べた結果、BENIは未受精卵から尾芽胚期(ステージ34)まで発現していた。また、ホールマウントin situハイブリダイゼーションによって調べた結果、原腸胚では表皮全体に発現していた。BENI mRNAの過剰発現による機能獲得実験やアンチセンスモルフォリノ(BENI-MO)を使った機能阻害実験を行った結果、胚の体軸が屈曲する表現型を示した。アクチビンの誘導作用によるアニマルキャップの伸長に対するBENIの影響を調べたところ、BENI mRNAの過剰発現により伸長は阻害され、BENI-MOでは伸長は促進された。これらの結果はBENIが原腸陥入運動に関与していることを示唆している。初期中胚葉遺伝子の発現に対する影響を調べたところ、BENI mRNAの過剰発現によって汎中胚葉マーカーであるXbrachyuryの発現が抑制された。内中胚葉マーカーMix. 1や背側中胚葉マーカーであるgoosecoidおよびchordinの発現は変化しなかった。BENIアミノ酸配列にはN末端側およびC末端側それぞれに推定核移行シグナルが存在した。蛍光タンパク質EGFPとの融合タンパク質をコードする遺伝子を作製し、そのmRNAを微量:注入して細胞内局在を観察した結果、BENI-EGFPタンパク質は核に局在した。核移行シグナルを欠失したBEM-ΔNLS-EGFPタンパク質は細胞全体で観察された。

In the first half of the day, the mid-stage embryos were cut and the mRNA was extracted early and immediately after treatment. The quantitative analysis and quantification of mRNA metrics are required to update the new specification sub-BENI specific specifications. According to the results of the BLASTP request, the same standard acid has been assigned to nearly all kinds of drugs, such as the number of samples, the number of dollars, and the number of samples. Don't worry about it, don't talk about it, report on it, and report it. The results of RT-PCR and BENI were similar to those of unfertilized eggs at the tail bud stage (34). The results showed that the whole epidermis of the original embryo and the whole epidermis of the original embryo were found in the whole epidermis of the original embryo and the whole epidermis of the original embryo. The results showed that the whole epidermis of the original embryo and the whole epidermis were found. The BENI mRNA filter enables the BENI-MO to block the test results, and the embryonic body flexion test shows that the machine is capable of preventing the pregnancy. The key role is to improve the performance of BENI, BENI mRNA and BENI-MO to improve the performance of the system. The results show that the original purchase of the BENI and the instigation of the transaction are instigated. In the early stage of mesodermis, there was no significant difference between the two groups, and the BENI mRNA was used to detect the inhibition of Xbrachyury in the early stage. Endo-mesoderm Mix. 1. The mesoderm, the goosecoid, the chordin, the mesoderm, the chordin, the mesoderm, the meso BENI, acid alignment, N-terminal, C-terminal, C-terminal, presumed nuclear migration, putative nuclear migration, presence of nuclei. The results of EGFP fusion were analyzed in this paper, and the results of BENI-EGFP were detected in the cytosol. The results of the nuclear test were detected by BENI-EGFP. BEM- delta NLS-NLS

项目成果

ツメガエル原腸陥入時のSDF-1/CXCR4の作用について

SDF-1/CXCR4 在非洲爪蟾原肠胚形成过程中的作用

• 发表时间: 2005
• 期刊: 日本発生生物学会 第38回大会 大会プログラム
• 作者: 福井 彰雅;北本 淳子;本間 幹啓;浅島 誠
• 通讯作者: 浅島 誠

SDF-1 alpha regulates mesendodermal cell migration during frog gastrulation.

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biochemical and biophysical research communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: A. Fukui;Toshiyasu Goto;J. Kitamoto;M. Homma;M. Asashima

特許

专利

• 发表时间: 2008

A novel gene, BENI is required for the convergent extension during Xenopus laevis gastrulation.

非洲爪蟾原肠胚形成期间的会聚延伸需要一种新基因 BENI。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Developmental Biology 303・1
• 作者: Narikawa;R.;et al.;Satoshi Sekiguchi;Satoshi Sekiguchi;Satoshi Sekiguchi;Kwon Jungkee;Kwon Jungkee;Motohiro Homma
• 通讯作者: Motohiro Homma

脊椎動物の初期発生における中胚葉形成を支配する新規遺伝子Brachyury Expression by Nuclear Inhibitor, BENI

Brachyury 表达，一种在早期脊椎动物发育过程中控制中胚层形成的新基因，由核抑制剂 BENI 开发