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ウイルス感染植物におけるマイクロRNA蓄積異常と病徴との関係についての解析

病毒感染植物中异常microRNA积累与疾病症状的关系分析

基本信息

批准号：
05J11577
负责人：
栗原志夫
金额：
$ 1.15万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

タバコモザイクウイルス(TMV)が感染した植物シロイヌナズナでは、ほとんどのmicroRNA(miRNA)の蓄積が非感染植物と比較して増加することがわかった。このメカニズムを調べるためには、miRNA生合成経路の解明が必要である。そこで、植物のmiRNA生合成経路の解明およびTMV感染におけるmiRNA蓄積異常の解明を本研究の目的とした。昨年度までに、miRNA生合成経路について詳細な解析を行ってきた。TMVがコードするタンパク質のなかで、126K複製酵素がRNAサイレンシングサプレッサー活性をもつことが報告されていたので、複製酵素がmiRNA経路への影響を及ぼすことが予測された。そこで、複製酵素がmiRNA生合成経路およびmiRNAの機能に及ぼす影響を調べた。複製酵素とmiRNA前駆体を一過的に共発現させる実験を試みた。その結果、複製酵素はmiRNA前駆体の蓄積には影響を与えないが、miRNA/miRNA* duplexを安定化し、miRNAがRISC複合体に取り込まれ機能を果たすのを抑えていることが示唆された。このことから、複製酵素はmiRNA/miRNA* duplexと結合することが予想された。そこで、複製酵素とmiRNA前駆体を同様に一過的に共発現させ、複製酵素に対する免疫沈降実験および免疫沈降物からのRNA抽出を行い、免疫沈降物にmiRNAおよびmiRNA*が含まれているという結果を得た。これにより、複製酵素はmiRNAとmiRNA*両方と結合することが示唆された。さらに、in vitroでの複製酵素とmiRNA/miRNA* duplexとの結合実験を行ったところ、複製酵素はduplexと結合できることがわかった。

The plants were infected by TMV. The microRNA (miRNA) was stored in non-infected plants. In order to understand the necessary information, the synthetic route of miRNA is very important. The pathways of miRNA biosynthesis in plants and plants were studied. TMV infection caused miRNA accumulation. The purpose of this study was to determine the objective of this study. Last year, miRNA was synthesized and analyzed. TMV, enzyme, RNA, enzyme, enzyme, The synthesis of miRNA by enzyme and enzyme, the pathway of synthesis, the mechanism of miRNA and the effect of enzyme. The enzyme miRNA precursors have been tested for a total of two years. The results of this study showed that the enzyme miRNA precursor was stored in the presence of antigens, miRNA/miRNA* duplex stabilizer, and miRNA RISC complex. The results showed that the results showed that the inhibition effect was significant. The combination of enzyme miRNA/miRNA* duplex and enzyme should be used to determine whether you would like to. The precursors of enzyme miRNA and enzyme miRNA* were the same as the results of the previous studies, and the results showed that the results showed that the immune precipitant was extracted from the immune deposit, the immune deposit was extracted from the immune deposit, the immune deposit was extracted from the immune deposit, the immune deposit was extracted from the immune deposit, and the immune deposit was extracted from the immune precipitate. the results showed that the results showed that the results were satisfactory. The combination of the enzyme miRNA miRNA* prescription and the enzyme test indicates the instigation of the disease. The combination of enzyme duplex, in vitro enzyme, enzyme and enzyme, enzyme and enzyme.