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ポリアミノ酸合成酵素を用いた新規生分解性高分子合成法の開発

利用聚氨基酸合酶开发新型可生物降解聚合物合成方法

基本信息

批准号：
16710044
负责人：
田畠健治
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16710044/
关键词：
ポリアミノ酸微生物生分解性高分子

项目摘要

高分子材料の利用の増加に伴い、廃棄された高分子材料による環境汚染が問題となっている。この問題の解決策の一つとして自然界の循環サイクルに組み込まれる生分解性高分子材料の利用、開発がある。しかし、現在、使用または研究されている生分解性プラスチックの多くは脂肪族ポリエステルから生り、機械的強度などの物性面で汎用性高分子に劣ることが、その利用の拡大を妨げている。一方、シルクなどのアミノ酸を構成単位としたポリペプチドからなる繊維は機械的強度に優れた生分解性材料であるが、大量生産が困難であり、高価格になる。そこで、任意のアミノ酸を基本構造とするポリアミノ酸の合成法を確立できれば、高性能な生分解性高分子材料の開発が可能になる。本研究はで微生物が産生するポリアミノ酸合成酵素を行いた新たなポリアミノ酸合成法の確立を目指す。そのために申請者は交付期間内において新規ポリアミノ酸合成酵素の探索を行う。昨年度までに環境からポリアミノ酸を合成する様々な微生物の単離を試みるために、スクリーニング方法を確立した。様々な環境中から微生物を分離し、富栄養寒天培地上で生育させた。生育した菌体のコロニーを観察し、粘性の高そうな菌体を選別した。この菌体を液体培地中で培養した。数日間培養後、遠心分離により培養上清を得た。この培養上清を純水中で透析し、低分子化合物を除去した。得られた高分子化合物の分子量を高速液体クロマトグラフィーにより測定し、微生物による生成物が高分子化合物であることを確認した。さらにこの高分子化合物をエタノール沈殿により粗精製した。得られた高分子化合物がポリアミノ酸であるかを確認するため、6N塩酸を加え、加水分解しポストカラム法によるアミノ酸分析を行った。約150サンプルについて分析を行い、新規ポリアミノ酸含むと思われる高分子を生産する微生物を単離した。この微生物の遺伝学的性質について調べた結果、本微生物はBacillus属の微生物であることが明らかとなった。

The increasing use of polymer materials and the environmental pollution caused by polymer materials A solution to this problem is to explore the utilization and development of biodegradable polymer materials in the natural world. In the past, the use of polymer materials has been studied. The decomposition of polymer materials has been studied. The mechanical strength of polymer materials has been studied. The physical properties of polymer materials have been studied. The strength of a mechanical component is excellent for biodegradable materials, and mass production is difficult. The basic structure and synthesis method of arbitrary acids are established, and the development of high performance biodegradable polymer materials is possible. This study is aimed at establishing a new method for the production of acid synthase by microorganisms. New regulations for the exploration of acid synthase during the delivery period In the past year, the method of microbial isolation and acid synthesis has been established. Microorganisms are isolated from the environment, and the environment is rich in nutrients. The growth of bacteria and the high viscosity of bacteria The bacteria were cultured in liquid medium. After several days of culture, the supernatant of the culture was isolated remotely. The culture supernatant is dialyzed in purified water to remove low molecular weight compounds. The molecular weight of polymer compounds was determined by high speed liquid chromatography, and the molecular weight of polymer compounds was determined by microorganism chromatography. The polymer compound was refined by the method of crude oil extraction. The analysis of high molecular weight compounds was carried out by the method of addition of 6N hydrochloric acid and hydrolysis. About 150 samples were collected for analysis, and the new regulations were applied to the production of microorganisms containing high molecular weight. The genetic properties of this microorganism are the result of adjustment, and this microorganism is the microorganism of Bacillus genus.