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鱗翅目昆虫の性分化機構の解明とその不妊虫放飼法への応用

鳞翅目昆虫性别分化机制的阐明及其在昆虫不育释放方法中的应用

基本信息

批准号：
17780045
负责人：
鈴木雅京
金额：
$ 2.11万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

Bmdsxはカイコの性分化に関わる遺伝子であり、性特異的スプライシングを受けることによって雌雄で異なる翻訳産物を生じる。既に我々は、Bmdsxの第4エクソンの5'端から15〜34ntの領域に位置するシスエレメント(CE1)に結合する何らかの核内因子がBmdsx pre-mRNAのオス型スプライシングを制御することを昨年の実績報告書において報告している。その後、オスの培養細胞(NIAS-Bm-M1細胞)の細胞核抽出物を用いたUV-cross linking assayを行うことによって、分子量約80kDaのタンパク質がCE1に特異的に結合することが明らかとなった。さらにCE1 RNA配列をリガンドに用いたRNA affinity chromatographyを行った結果、分子量約80kDaのタンパク質(p80)の他に40kDa及び35kDaのタンパク質(p40、p35)を精製することが出来た。それぞれのタンパク質の内部アミノ酸シークエンスを決定した結果、p80とp40はそれぞれp-element somatic inhibitor(PSI)、Hu/elav class neuron specific RNA binding protein(ELAV)に高い相同性を示すタンパク質であり、p35はBmSqd2であることが明らかとなった。オスの培養細胞におけるこれらのタンパク質の発現をRNAiによって抑制した結果、PSIの発現を抑制した場合にのみBmdsxのスプライシングパターンがオス型からメス型へと転換することが確認された。これらの事実は、PSIのカイコホモログがBmdsxの性特異的スプライシング制御因子として機能することを強く示唆している。PSIが性分化に関与するとの報告は過去に例が無く、本研究による今回の発見は高い評価を受けると期待される(論文投稿準備中)。

Bmdsx is a sexually differentiated, sex-specific hybrid. We report in last year's performance report on the control of Bmdsx pre-mRNA gene expression in the region from 15 to 34nt at the 4th end of the Bmdsx gene. The nuclear extracts from cultured NIAS-Bm-M1 cells were analyzed by UV-cross linking assay. The molecular weight was about 80kDa. As a result of RNA affinity chromatography for CE1 RNA alignment, a protein with molecular weight of about 80kDa (p80), another protein with molecular weight of 40kDa and a protein with molecular weight of 35kDa (p40, p35) were purified. The p80 and p40 are p-element somatic inhibitor(PSI) and Hu/elav class neuron specific RNA binding protein(ELAV). The expression of PSI in cultured cells was inhibited by RNAi. The expression of PSI was inhibited by RNAi. This is the case with PSI and Bmdsx. PSI gender differentiation related to the report is not the case in the past, this study, the current review of the report is expected to be received (paper preparation)