分子シャペロンによる虚血性疾患の予防と治療を目指した基礎的研究

利用分子伴侣预防和治疗缺血性疾病的基础研究

• 批准号: 17790077
• 负责人: 山岸 伸行
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kyoto Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790077/
• 关键词: 分子シャペロン; アポトーシス; ATP枯渇; 分子生物学; Hsp105

前年度に引き続きhsp105プロモーターの下流にルシフェラーゼ遺伝子を連結したコンストラクトを安定に発現するC3H10T1/2細胞を用いてHsp発現誘導物質の探索を試みた。今年度は非ステロイド系抗炎症薬(NSAID)以外の物質についても検討するため、数種の天然物抽出物についてHspの誘導性を検討した結果、Hsp発現誘導物質の発見には至らなかったが、逆に熱ショックによるHspの発現誘導を抑制する物質として牛蒡子抽出物中のArctigeninを見出した。Hsp105がATP枯渇状態においてタンパク質の変性や細胞死を抑制することから、Hsp105が細胞内においてどのようなタンパク質をターゲットとして変性を抑制するのか明らかにするために、前年度に引き続き細胞タンパク質をTriton X-100可溶性画分と不溶性画分に分け、ATP枯渇によりTriton X-100に対する溶解性が変化するタンパク質を検索した。前年度はSDS-PAGEによる分離を試みたが、候補タンパク質の分離が不完全にあったため同定に至らなかったため、今年度は等電点および分子量で分離する2次元電気泳動により検討したところ、ATP枯渇によりTriton X-100可溶性画分から消失する分子量約30kDa、等電点6付近のスポットがHsp105の高発現により減少が抑制された。現在、このスポットについてトリプシン消化後、MALDI-TOS-MSを用いたペプチドマスフィンガープリンティングにより同定を試みている。また、ATP枯渇状態による細胞死がアポトーシスにより生じており、Hsp105の高発現はHsp70同様ATP枯渇状態によるアポトーシスを抑制することが明らかになっていたが、今年度はHsp105のATP枯渇状態によるアポトーシスの抑制機構を明らかにするため、caspaseの活性について検討したところ、ATP枯渇によりcaspase-3、caspase-8、caspase-9の活性化が確認されたが、Hsp105の高発現はcaspase-9の活性化には影響を与えず、aspase-3およびcaspase-8の活性化を抑制した。これらの結果はHsp105はATP枯渇により誘導されるアポトーシスのうち、ミトコンドリア非依存的な部分を抑制していることを示唆しており、今後さらに検討する必要がある。

The previous year's hsp105 プロモーターのdegradable にルシフェラーゼ伝子をconnection したコンストWe tested the stability of C3H10T1/2 cells using Hsp-inducing substances. This year's non-anti-inflammatory drugs (NSAIDs) are non-anti-inflammatory substances other than NSAIDs, several kinds of natural product extracts, Hsp-inducing properties, and Hsp results.発 appear inducing substance の発见には to らなかったが, inverse heat ショックによるHsp の発 appear The inducing and inhibiting substance is Arctigenin in the burdock seed extract. Hsp105's ATP withered status is low and the quality is low and the cell death is inhibited. Hsp105 is intracellular and intracellular.うなタンパク性をターゲットとして変性を inhibit するのか明らかにするために、Previous year's にuhinき続きcell タンパク性をTriton X-100 Soluble Drawing Point and Insoluble Drawing Point, ATP Dry Triton Previous year's SDS-PAGE Separation Test, Candidate Separation, Incomplete Separation, Same Determination, and Separation as a Candidateため、This year's isoelectric point molecular weight separation する2-dimensional electrophoresis により検したところ、ATP dry によりTriton X-100's solubility is reduced, its molecular weight is about 30kDa, and its isoelectric point is close to 6. Now, after digestion of このスポットについてトリプシン, MALDI-TOS-MSを Use the いたペプチドマスフィンガープリンティングにより同定をtrial みている.また, ATP dry state によるcell death がアポトーシスにより生じており, Hsp105's high performance is the same as Hsp70's ATP status. This year's Hsp105のA TP dry status によるアポトーシスの inhibiting mechanism を明らかにするため, cas Confirmation of activation of pase, activation of ATP, caspase-3, caspase-8, and caspase-9 Hsp105 has an effect on the activation of caspase-9, and Hsp105 has an influence on the activation of caspase-9, and aspase-3 has an inhibitory effect on the activation of caspase-8.これらのRESULTS はHsp105はATP drying によりinducing されるアポトーシスのうち、ミトコンドリアThe non-dependent part of the なを restrains the していることをshows the instigation しており, and the future さらに検するnecessary がある.

项目成果

The phenylic hydroxyl group is essential for the induction of stress response by sodium salicylate.

苯羟基对于水杨酸钠诱导应激反应至关重要。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Biochem. Biophys. Res. Commun. 350
• 作者: Miyamoto K;Miyake S;Mizuno M;Oka N;Kusunoki S;Yamamura T;Nobuyuki Yamagishi
• 通讯作者: Nobuyuki Yamagishi

Different localization of Hsp105 family proteins in mammalian cells.

• DOI: 10.1016/j.yexcr.2007.06.009
• 发表时间: 2007-10
• 期刊: Experimental cell research
• 影响因子: 3.7
• 作者: Youhei Saito;N. Yamagishi;T. Hatayama

Hsp105高発現による過酸化水素誘導アポトーシスの抑制機構の解析

Hsp105高表达抑制过氧化氢诱导细胞凋亡的机制分析

• 发表时间: 2008
• 作者: N.Yamagishi;S.Tokunaga;K.Ishihara;Y.Saito;T.Hatayama;山岸伸行 他2名
• 通讯作者: 山岸伸行 他2名

Hsp105はp38 MAPK経路を介して過酸化水素誘導アポトーシスを抑制する

Hsp105 通过 p38 MAPK 途径抑制过氧化氢诱导的细胞凋亡

• 发表时间: 2007
• 作者: N.Yamagishi;S.Tokunaga;K.Ishihara;Y.Saito;T.Hatayama;山岸伸行 他2名;山岸伸行 他2名
• 通讯作者: 山岸伸行 他2名