細胞接着分子による上皮細胞間の物質の透過性制御機構の解析

细胞粘附分子控制上皮细胞间物质通透性的机制解析

• 批准号: 17790182
• 负责人: 平林 享
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790182/
• 关键词: 細胞接着; 上皮細胞; 透過性制御

細胞間の物質の透過は、上皮細胞の細胞間結合であるタイトジャンクションや腎臓糸球体上皮細胞ポドサイトの細胞間結合であるスリット膜に局在する細胞接着分子によって制御されていると考えられている。私はタイトジャンクションに局在するPDZ蛋白MAGI-1に結合する分子として細胞接着分子JAM4を見いだし、これらの分子が細胞間の物質の透過性制御に関わることを報告している。今年度はJAM4の細胞表面の局在・発現を制御する分子機構を解明する一端として、サイトカインによる上皮細胞間結合再構築時のJAM4の局在変動を検討した6マウス乳腺上皮細胞NMuMGにTGFを作用させたときに、JAM4は細胞内に取り込まれ、一部は初期エンドソームに分布した。したがって、JAM4は上皮細胞において細胞間結合の構築を変化させる条件下で、エンドサイトーシスによる制御を受けることが示された。JAM4の細胞質内領域をバイトにした酵母ツーハイブリッドスクリーニングにより、JAM4に結合する分子として新たにPDZ蛋白LNX1を同定した。LNX1はもともとNotchシグナルに関与して細胞運命決定に関わる分子Numbのリガンドとして同定された分子である。Numbはエンドサイトーシスに重要なEps15やα-adaptinと相互作用してNotchのエンドサイトーシスを促進することが知られている。そこでLNX1がJAM4のエンドサイトーシスに関わるかを解析した。腎臓からの免疫共沈および免疫蛍光染色により内在性のJAM4とLNX1が相互作用すること、NumbがLNX1を介してJAM4と間接的に相互作用し、三者が複合体になることを確認した。LNX1を過剰発現させるとJAM4のエンドサイトーシスが促進されること、この現象はLNX1を介してJAM4がNumbと相互作用していることによって引き起こされることも明らかにした。最後に、TGF作用下で観察されるNMuMG細胞でのJAM4のエンドサイトーシスにLNX1が関わることをノックダウンにより明らかにした。以上の結果からJAM4の局在・発現を制御する分子機構の一端が解明された。

Intercellular の の material through は, combination between epithelial cells の で あ る タ イ ト ジ ャ ン ク シ ョ ン や renal viscera si sphere epithelial cells ポ ド サ イ ト の between cells combined with で あ る ス リ ッ ト membrane に bureau in す る cells and molecules に よ っ て suppression さ れ て い る と exam え ら れ て い る. Private は タ イ ト ジ ャ ン ク シ ョ ン に bureau in す る PDZ proteins に tells - 1 combined す る molecular と し て cells and molecules JAM4 を see い だ し, こ れ ら が の molecules between cells の の material through sexual suppression に masato わ る こ と を report し て い る. Our は JAM4 の cell surface の bureau in · 発 now を suppression す る molecular institutions を interpret す る end と し て, サ イ ト カ イ ン に よ る between epithelial cells when combined with constructing again の JAM4 の bureau in - を beg し 検 た 6 マ ウ ス mammary gland epithelial cells NMuMG に TGF を role さ せ た と き に, JAM4 は intracellular に take り 込 ま れ, a Youdaoplaceholder0 initial エ ドソ ムに ムに ムに ムに ムに distribution た た. し た が っ て, JAM4 は epithelial cells に お い て between cells combined with の build を variations change さ せ る で, under the condition of エ ン ド サ イ ト ー シ ス に よ る suppression を by け る こ と が shown さ れ た. Cytoplasm area JAM4 の を バ イ ト に し た yeast ツ ー ハ イ ブ リ ッ ド ス ク リ ー ニ ン グ に よ り, JAM4 に combining す る molecular と し て new た に PDZ proteins LNX1 を be し た. LNX1 は も と も と Notch シ グ ナ ル に masato and し て cell destiny decided に masato わ る molecular Numb の リ ガ ン ド と し て with fixed さ れ た molecular で あ る. Numb は エ ン ド サ イ ト ー シ ス に important な Eps15 や alpha adaptin と interaction し て Notch の エ ン ド サ イ ト ー シ ス を promote す る こ と が know ら れ て い る. そ こ で LNX1 が JAM4 の エ ン ド サ イ ト ー シ ス に masato わ る か を parsing し た. Renal viscera か ら の immune were shen お よ び 蛍 light dye に よ り internality の JAM4 と LNX1 が interaction す る こ と, Numb が LNX1 を interface し て JAM4 と indirect が に し interaction, three complex に な る こ と を confirm し た. LNX1 を before turning 発 now さ せ る と JAM4 の エ ン ド サ イ ト ー シ ス が promote さ れ る こ と, こ の phenomenon は LNX1 を interface し て JAM4 が Numb と interaction し て い る こ と に よ っ て lead き up こ さ れ る こ と も Ming ら か に し た. Under the action of final に, TGF で 観 examine さ れ る NMuMG cells で の JAM4 の エ ン ド サ イ ト ー シ ス に LNX1 が masato わ る こ と を ノ ッ ク ダ ウ ン に よ り Ming ら か に し た. The above <s:1> results が らJAM4 <s:1> bureau at · occurrence を control する molecular mechanism が explanation された.

项目成果

Monoclonal antibody 7F9 recognizes rat protein homologous to human carboxypeptidase‐M in developing and adult rat lung

• DOI: 10.1111/j.1440-1843.2006.00961.x
• 发表时间: 2007-01
• 期刊: Respirology
• 影响因子: 6.9
• 作者: N. Fujiwara;Mitsunobu Ikeda;S. Hirabayashi;Hiroki Mori;Madoka Shirasawa;A. Kansaku;M. Sunamori;Y. Hata

A CTX family cell adhesion molecule, JAM4, is expressed in stem cell and progenitor cell populations of both male germ cell and hematopoietic cell lineages

• DOI: 10.1128/mcb.01502-06
• 发表时间: 2006-11-01
• 期刊: MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY
• 影响因子: 5.3
• 作者: Nagamatsu, Go;Ohmura, Masako;Ohbo, Kazuyuki
• 通讯作者: Ohbo, Kazuyuki

Synaptic scaffolding molecule (S‐SCAM) membrane‐associated guanylate kinase with inverted organization (MAGI)‐2 is associated with cell adhesion molecules at inhibitory synapses in rat hippocampal neurons

• DOI: 10.1111/j.1471-4159.2006.04170.x
• 发表时间: 2007-01
• 期刊: Journal of Neurochemistry
• 影响因子: 4.7
• 作者: Kazutaka Sumita;Y. Sato;Junko Iida;Akira Kawata;Mamiko Hamano;S. Hirabayashi;Kikuo Ohno;E. Peles;Y. Hata

CIN85 is localized at synapses and forms a complex with S-SCAM via Dendrin

• DOI: 10.1093/jb/mvj105
• 发表时间: 2006-05-01
• 期刊: JOURNAL OF BIOCHEMISTRY
• 影响因子: 2.7
• 作者: Kawata, Akira;Lida, Junko;Hata, Yutaka
• 通讯作者: Hata, Yutaka

Ligand-of-Numb X is an endocytic scaffold for junctional adhesion molecule 4.

Ligand-of-Numb X 是连接粘附分子 4 的内吞支架。

• 期刊: Oncogene (In press)
• 作者: Ishiguro M;Yamamoto H;Masuda M;Kozai NI;Takei Y;Tanaka S;Sato T;Segawa H;Taketani Y;Arai H;Miyamoto K;Takeda E.;宮本賢一;Kanasaku A et al.
• 通讯作者: Kanasaku A et al.