神経回路網形成過程におけるチロシンキナーゼFes/Fpsの役割

酪氨酸激酶Fes/Fps在神经网络形成过程中的作用

• 批准号: 17790188
• 负责人: 高橋 秀典
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Himeji Dokkyo University (2006)Kobe University (2005)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790188/
• 关键词: チロシンキナーゼ; マクロファージ; 微小管; 神経; 神経細胞; 軸索ガイダンス; Fes; Fps; 血液細胞

昨年度までの研究成果として我々は神経回路網形成にかかわる分子の一つとしてチロシンキナーゼであるFes/Fpsを同定した。本年度はチロシンキナーゼと微小管の動態調節の関係を明らかにするためにマクロファージなどに発現するチロシンキナーゼについて変異株を作成し、機能発現時における微小管ダイナミクスへの影響を解析した。具体的にはまずインビトロでマクロファージを経て破骨細胞へと分化成熟させ、骨吸収を刺激依存性に定量する解析方法を確立した。またヒト白血病細胞株HL60を、M-CSF、RANKL、ビタミンD3など各種分化因子の存在下で、マクロファージ様の分化を経てTRAP(酒石酸抵抗性酸ホスファターゼ)陽性かつ多核の成熟破骨細胞様に分化した。さらに骨吸収の定量的解析法として、象牙質切片上で破骨細胞を分化成熟させ、ATP刺激により形成した吸収窩の数を定量する方法を確立した。そこで微小管に影響を与えるチロシンキナーゼとしてSykに着目し、shRNA-Sykの永久発現型のHL60を作成して上記方法で解析した。こうしてSykの下流で、微小管の翻訳後修飾が影響を受ける事、微小管のアセチル化のダイナミクスが骨吸収に必須であることを確認した。これら成果の一部は本年中に発表予定である。今後は動画による解析を中心にさらに詳細な分子動態を追跡してチロシンキナーゼを介した細胞骨格の変化とリソソーム様顆粒の放出過程を分子作用機序として明らかにする。さらにチロシンキナーゼの発現を抑制した神経細胞を用いて、軸索の形態とその輸送能、もしくは神経回路網形成過程などについても、野生株と比較しつつ解析を進めていく。

The results of last year's research on the までのとして我々は神経circuit network formed the にかかわるmoleculesの一つとしてチロシンキナーゼであるFes/Fpsを同定した. This year's dynamic adjustment of the relationship between the microtubule and the microtubule is a dynamic adjustment of the current year. The チロシンキナーゼについて変different strainを is made, and the functional 発 present におけるmicrotubule ダイナミクスへのeffect をanalysis is した. Specifically, the dependence of osteoclast differentiation and maturation and bone resorption on stimulation has been quantitatively determined and the analysis method has been established.またヒトleukemia cell line HL60を, M-CSF, RANKL, ビタミンD3など in the presence of various differentiation factors, マクロファージ様のdifferentiation を経てTRAP (tartaric acid resistant acid ホスファターゼ) positive かつMature osteoclasts 様にdifferentiation した. The quantitative analysis method of bone resorption has been established. The differentiation and maturation of osteoclasts on dentine slices has been established. The number of resorption pits formed by ATP stimulation has been established. The microtubule-influenced microtubule was produced by the microtubule-influenced microtubule system, and the shRNA-Syk permanent HL60 model was produced using the above mentioned method and analyzed.こうしてSyk's obscene, tiny tube's modification after modification, affected by ける事, tiny It is necessary to confirm the bone resorption of the tube. Part of the results of this year are scheduled to be announced in the middle of this year. Future Animation Analysis Center Details Molecular Dynamic Tracking Tracking Introduction The release process of the cell bone structure and the release process of the cell bone structure and the molecular action mechanism are the same. The さらにチロシンキナーゼの発appears to inhibit the した神経 cells and uses the いて, the axonal form and とその to transport energy , もしくは神経circuit network formation process などについても, wild strain と comparison しつつ analysis を advance めていく.