PARP-1によるHIV-1のインテグレーションおよび遺伝子発現の制御機構の解析

PARP-1对HIV-1整合和基因表达的控制机制分析

基本信息

  • 批准号:
    17790310
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.18万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2005
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2005 至 2007
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

HIV-1が細胞に侵入した後、逆転写反応によるウイルスDNAゲノムの合成、ウイルスDNAゲノムとウイルスタンパク質の核内輸送、そして細胞染色体遺伝子へのウイルスDNAゲノムのインテグレーションという一連の反応が進行する。この過程では、Pre-integration complex(PIC)が形成される。前年度まで、PICの構成成分にPARP-1がおよぼす影響を解析してきたが、実験手法上の問題もあり、PARP-1の関与を明確にすることが出来なかった。そこで、今年度は、異なるアプローチによる解析を進めた。具体的には、PARP-1及びその他の宿主細胞因子を標的とするsmall interference RNA(siRNA)を導入した細胞にHIV-1を感染させ、ウイルスDNAゲノムとウイルスタンパク質の核内への輸送効率と、細胞染色体遺伝子へのウイルスDNAケノムのインテグレーション効率について、real-time PCR法を用い、経時的な定量解析を行った。また細胞質と核の分画も行い、これらのサンプルにおけるウイルスDNAの定量解析も行った。その結果、PARP-1に関して明確な解析結果は得られなかったが、別の宿主細胞因子であるadaptor-related protein complex 2 alpha subunit(AP2a)に対するsiRNAが、HIV-1ゲノムの核移行とその後のインテグレーション反応を著明に亢進することがわかった。またAP2aとHIV-1ゲノムの核移行に関わる他の細胞因子の会合を示唆する解析結果が共焦点レーザー顕微鏡を用いた解析により明らかになった。
After HIV-1 invasion into cells, reverse transcription of HIV-1 causes the synthesis of HIV-1 DNA molecules, the nuclear transport of HIV-1 DNA molecules, and the reverse transcription of HIV-1 DNA molecules. This process is called Pre-integration complex(PIC). In the past year, the impact of PARP-1 on PIC composition was analyzed, and the problem of PARP-1 was clarified. This year's resolution is different from that of the previous year. Specifically, small interference RNA(siRNA) targeting PARP-1 and other host cytokines was introduced into cells infected with HIV-1, and its DNA was used to determine the efficiency of nuclear transport of DNA, the efficiency of chromosomal DNA transfer, and real-time PCR for quantitative analysis. Cytoplasmic and nuclear analysis, quantitative analysis of DNA The results showed that PARP-1 related protein analysis showed that the adaptor-related protein complex 2 alpha subunit(AP2a) was related to siRNA and HIV-1 related nuclear migration, and the expression of PARP-1 related protein was significantly increased. The analysis results of AP2a and HIV-1 are related to the convergence of other cytokines in the nuclear transition.

项目成果

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会议论文数量(0)
专利数量(0)
Inhibitory function of adaptor-related protein complex 2 alpha subunit in the process of nuclear translocation of human immunodeficiency virus type 1 genome.
接头相关蛋白复合物2α亚基在人类免疫缺陷病毒1型基因组核转位过程中的抑制功能。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Kameoka;Masanori;Yukiko Kitagawa
  • 通讯作者:
    Yukiko Kitagawa
Poly(ADP-ribose)polymerase-1 is required for integration of the human immunodeficiency virus type-1 genome near centromeric alphoid DNA in human and murine cells.
聚(ADP-核糖)聚合酶-1 是人类和鼠类细胞中人类免疫缺陷病毒 1 型基因组整合到着丝粒类 DNA 附近所必需的。
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  • 期刊:
  • 影响因子:
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    白川 利朗

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  • 资助金额:
    $ 2.18万
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知道了