新規炭疸菌検出法の開発と感染死の法医鑑定への応用
新型炭疽检测方法的研制及其在感染死亡法医学诊断中的应用
基本信息
- 批准号:17790418
- 负责人:
- 金额:$ 2.24万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份:2005
- 资助国家:日本
- 起止时间:2005 至 2006
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
(目的)生物テロの危険性が高まるなか、炭疽菌は高い感染力・致死率・安定性を有し、最も生物兵器として利用しやすいことから、より高感度の検出法の開発が求められている。古典的な検査法として知られているガンマファージ感染テストは、その特異性及び検出感度が高いが、炭疽菌の分離同定及び培養を必要とするため判定までに時間がかかることが欠点であった。免疫抗体を用いたELISAや免疫ストリップによる測定は迅速であるが特異性及び検出感度においてガンマファージ感染テストに及ばない。よってファージ感染テストと同等の特異性を持ちELISAや免疫ストリップの迅速性をもつ高感度検出法の確立を目指した。(方法)炭疽菌に特異的に結合するガンマファージの蛋白質(PlyG)をコードする遺伝子をクローニングし、発現プラスミドに組込んだ。これを大腸菌に導入し、GST融合タンパク質として大量発現させ、精製した。ニトロセルロース膜上に陽性対照となる炭疽菌と陰性対照となる他のバチルス属をスポットし、GST融合PlyGを反応させた後、酵素標識した抗GST抗体を反応させた。これに発光基質を加えてシグナルを検出し、特異性、検出感度を検討した。同様に芽胞化培地を用いて炭疽菌及びバチルス属の枯草菌、セレウス菌の芽胞を作製し、特異性、検出感度を検討した。(成果)GST融合PlyGおよびPlyGB(結合領域のみ)、GSTを切り離したPlyGおよびPlyGBの精製に成功した。精製したGST融合PlyGBを用いて上記の方法で結合特異性・検出感度を調べたところ、陰性対照とは全く反応することなく、炭疽菌の栄養型を特異的に検出することが出来た。また炭疽菌芽胞においても発芽を介して特異的に検出することが明らかとなった。以上より、ガンマファージのPlyGの結合領域のみをもつPlyGBが炭疽菌認識に十分な活性をもつことが明らかとなった。以上の結果をまとめた投稿論文が掲載された。
Objective: To explore the development of detection methods for biological weapons with high risk, high infectivity, lethality and stability of anthrax. The classical detection method is used to determine the specificity and sensitivity of infection, isolation and culture of anthrax. Immunoantibody assay is rapid, specific and sensitive. The specificity of the ELISA and the rapidity of the ELISA are indicated by the establishment of a highly sensitive assay. (Method) Anthrax specific binding protein (PlyG) protein expression vector, development vector and protein expression vector. The introduction of E. coli, GST fusion, and purification The enzyme is identified by the enzyme PlyG. The light matrix is enhanced by detection, specificity and sensitivity. In the same way, the spore culture of Bacillus anthracis and Bacillus subtilis was studied in terms of production, specificity and sensitivity. (Results)GST fusion PlyG GST-fused PlyGB was purified using the method described above, and the specificity, sensitivity, and specificity of PlyGB were detected. The spore of Anthracnose is a special kind of spore. The above mentioned PlyG and PlyGB are very active in the field of anthrax recognition. The above results are published in the papers submitted.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Sensitive detection of Bacillus anthracis using a binding protein originating from γ-phage
- DOI:10.1111/j.1348-0421.2007.tb03894.x
- 发表时间:2007-01-01
- 期刊:
- 影响因子:2.6
- 作者:Fujinami, Yoshihito;Hirai, Yoshikazu;Yasuda, Jiro
- 通讯作者:Yasuda, Jiro
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ patent.updateTime }}
藤浪 良仁其他文献
藤浪 良仁的其他文献
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
{{ truncateString('藤浪 良仁', 18)}}的其他基金
Detection of pathogenic microorganisms from forensic materials using MALDI-TOF MS
使用 MALDI-TOF MS 检测法医材料中的病原微生物
- 批准号:
22K10624 - 财政年份:2022
- 资助金额:
$ 2.24万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
相似海外基金
糖鎖・糖タンパク質を利用した歯性感染症の分子イメージング技術の開発
利用糖链和糖蛋白开发牙科感染分子成像技术
- 批准号:
24K13128 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 2.24万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
高齢者施設における感染症の疾病負荷ならびに集団感染リスク因子に関する前向き研究
养老院传染病负担及群体感染危险因素的前瞻性研究
- 批准号:
24K13389 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 2.24万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
重症尿路感染症における全自動尿中有形成分分析装置による抗菌薬治療効果の早期判定
使用全自动尿液颗粒分析仪早期确定严重尿路感染的抗菌治疗效果
- 批准号:
24K12498 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 2.24万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
脂溶性ビタミンの免疫誘導能を利用した経気道接種型の気道粘膜感染症ワクチンの開発
利用脂溶性维生素的免疫诱导能力开发呼吸道粘膜感染疫苗
- 批准号:
24K11634 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 2.24万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
貪食細胞の超高感度検出に基づく血流感染症の早期診断法の開発
基于吞噬细胞超灵敏检测的血流感染早期诊断方法的建立
- 批准号:
24K11635 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 2.24万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
ウイルス感染症におけるリボソーム翻訳品質管理機構を理解する
了解病毒感染中核糖体翻译质量控制机制
- 批准号:
24K09364 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 2.24万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
感染症に対するレジリエンスのある高齢者施設の計画に関する研究
抗传染病养老设施规划研究
- 批准号:
24K07824 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 2.24万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
早産児・低出生体重児における重症感染症関連病原性常在細菌(Pathobiont)の検索
寻找与早产儿和低出生体重儿严重感染相关的致病常驻细菌(pathobiont)
- 批准号:
24K11033 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 2.24万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
新興感染症のシステマティック・レビューを機械学習を用いて簡易に実施するための研究
利用机器学习轻松对新发传染病进行系统评价的研究
- 批准号:
24K13518 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 2.24万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
魚類のAhRを介したヘルパーT細胞の分化機構の解明と感染症に対する感受性に関する研究
鱼类辅助性T细胞AhR介导分化机制的阐明及传染病易感性研究
- 批准号:
24K15318 - 财政年份:2024
- 资助金额:
$ 2.24万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)