权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

発癌におけるDNA低メチル化の役割に関する研究

DNA低甲基化在癌变中的作用研究

基本信息

批准号：
17790449
负责人：
上田佳秀
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790449/
关键词：
DNAメチル化 DNMT1 大腸癌 Dnmt3b ICF症候群

项目摘要

DNMT1は維持メチル化酵素と呼ばれ、細胞分裂の際にDNAメチル化を維持するために作用する酵素である。マウスにおいては、Dnmt1の欠失によってほぼすべてのDNAメチル化が消失し、初期胎生致死となることが明らかとなっている。今回我々は、大腸癌細胞株を用い、DNMT1のコンディショナルノックアウト細胞を作製することにより、大腸癌細胞におけるDNAメチル化の役割を明らかにすることを目的とし、以下の解析を行った。大腸癌細胞株HCT116において、DNMT1の機能ドメインをloxP配列で挟んだノックインベクターを用い、相同組み換えを生じさせることよつて、コンディショナルにDNMT1を欠失させることが可能なアレルをもつ細胞を作成した。これを2回繰り返すことによって、DNMT1のコンディショナルノックアウト細胞を作成した。この細胞にCreを発現させ、DNMT1を欠失させたところ、ゲノム全体のDNAメチル化が低下し、それに伴って細胞増殖が停止した。詳細な解析により、細胞のDNAメチル化の消失に伴ってG2/Mチェックポイントが活性化され、G2期で細胞分裂が停止することが明らかとなった。さらに、その後の異常な有糸分裂への進行に伴って、様々な染色体異常やセントロメアの増幅を伴い、細胞死(mitotic catastrophe)が誘導されることが明らかとなった。これらの結果より、大腸癌細胞の増殖と生存においてDNAメチル化が必須であることが明らかとなった。

DNMT1 maintained enzyme activity, cell division, DNA, enzyme activity, enzyme activity. The disease was caused by the loss of DNA, the disappearance of the disease, the death of the initial birth, the death of the baby, the death of the baby and the death of the fetus. This time, we use the cell line of large cancer cell line, the DNMT1 cell line, the cell line of large cancer cell line, the cell line of cancer cell line, the cell line of cancer cell line, and the cell line of cancer cell line. The cancer cell lines of HCT116, DNMT1, and DNMT1 can be used in the same group of cancer cell lines, such as the cancer cells of the same group, the cancer cells of the same group, the cancer cells of the large cancer cell line, the cancer cells of the large cancer cell line, the cancer cell line of the large cancer cell line, the cancer cell line of the large cancer cell line, the cancer cell line of the large cancer cell line, the cancer cell line of the large cancer cell line, the cancer cell line of the large cancer cell line, the cancer cell line of the large cancer cell line, the cancer cell line of the large cancer cell line, the cancer cell line of cancer cell line, the cancer cell Please return to your home for two times, and then you will find that the DNMT1 has been made into a cell. The Cre is not present, the DNMT1 is missing, the whole DNA is low, and the cellular colonization is stopped. The disappearing of DNA, the disappearing of cell, the disappearance of activation, the cessation of cell division in G2 phase, and the termination of cell division in G2 phase. After the onset of the disease, there is often a series of mitosis, the chromosomes are often divided, the chromosomes are divided into two groups, and the cell death (mitotic catastrophe) leads to the death of the cells. The results show that it is necessary to confirm that the survival rate of large cancer cell colonies, the survival cycle and the DNA tumorigenesis of cancer cells must be confirmed.