リン代謝調節におけるリン酸トランスポーターエンドサイトーシス複合体の構造と機能

磷酸转运蛋白内吞复合物调节磷代谢的结构和功能

• 批准号: 17790554
• 负责人: 竹谷 豊
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790554/
• 关键词: リン酸; トランスポーター; ezrin; 高分子複合体; トランスポートソーム; マイクロドメイン; PTH; 分子複合体

近位尿細管に発現するナトリウム依存性リン酸トランスポーター(NaPi-IIa)は、腎臓でのリン再吸収活性の律速段階を担う重要な分子である。我々は、近位尿細管細胞の刷子縁膜上において、NaPi-IIaは、ezrinと呼ばれるアンカータンパクを介して細胞骨格アクチンと結合し、巨大な分子複合体を形成していることを明らかにしてきた。昨年度の研究では、PTHによるNaPi-IIa複合体の調節機構においてPTHの下流にあるPKAおよびPKCがezrinと呼ばれるリンカー蛋白をリン酸化することを見出した。本年度は、さらに詳細に検討を行った結果、PKAおよびPKCにより、ezrinのN末端にあるFERMドメインの249番目のserine残基のリン酸化が、NaPi-IIa複合体形成に重要なscaffolding蛋白であるNHERF-1/EBP50との結合に極めて重要であり、リン酸化によりNHERF-1/EBP50との相互作用がほぼ完全に消失し、近位尿細管細胞におけるNaPi-IIaの細胞膜状上での局在を著しく減少させることを明らかにした。さらに、Blue-Native-PAGEとSDS-PAGEを用いた2次元電気泳動法によりNaPi-IIa複合体の解析を行ったところ、NaPi-IIaには複数の高分子複合体が存在することが明らかとなった。250〜300kDa付近の複合体は、従来から言われているNHERP-1/EBP50およびezrinを含む分子から構成されいたが、1000〜1300kDa付近の高分子複合体は、これらのscaffolding蛋白やリンカー蛋白を含まず、新たな複合体が存在すると考えられた。

Near-position urine tubule development is dependent on the acid receptor (NaPi-IIa), which is an important molecule in the rate stage of renal resorption activity. The membrane of proximal urinary tubule cells is formed by the combination of large molecular complexes. The regulatory mechanism of PTH and PKC in the downstream of PTH has been revealed. This year, we conducted a detailed analysis of the results, PKA and PKC, and the N-terminal region of ezrin. The serine residue of FERM in the 249-position was acidified. The interaction between NHERF-1 and EBP50 was completely disappeared. Nearby urine tubule cells are in the middle of the cell membrane. The analysis of NaPi-IIa complex by two-dimensional electrokinetic electrophoresis and Blue-Native-PAGE and SDS-PAGE was carried out. The 250 ~ 300kDa molecular complex is composed of NHERP-1/EBP50 and ezrin, and the 1000 ~ 1300kDa molecular complex is composed of NHERP-1/EBP50 and ezrin.

项目成果

Vitamin D and phosphate metabolism; relationship with aging-regulating gene

维生素D和磷酸盐代谢；

• 发表时间: 2006
• 期刊: Clin Calcium 16・7
• 作者: 長瀬洋之;大田 健;Taketani Y
• 通讯作者: Taketani Y

Immobilization decreases duodenal calcium absorption through a 1,25-dihydroxyvitamin D-dependent pathway.

固定通过 1,25-二羟基维生素 D 依赖性途径减少十二指肠钙吸收。

• 发表时间: 2006
• 期刊: J Bone Miner Metab. 24(4)
• 作者: Tatsumi S;Ishii K;Amizuka N;Li M;Kobayashi T;Kohno K;Ito M;Takeshita S;Ikeda K.;Segawa H.;Kuwahata M.;Segawa H.;Ito M.;Chikahisa S.;Kitaoka K.;Sawada N.;Ohnishi R.;Kuwahata M.;Miyamoto K.;Tatsumi S.;Tatsumi S.;宮本賢一;瀬川 博子;宮本賢一;宮本賢一;宮本賢一;桑波田雅士;宮本賢一;宮本賢一;伊藤美紀子;Miyamoto K.;Ito M.;Takeda E.;Kuwahata M.;Segawa H.;Chikahisa S.;Sawada N.;Tani Y.;Yamamoto T.;Kitaoka K.;Segawa H.;Nishida Y.;Takeda E.;Sato T.
• 通讯作者: Sato T.

Alternative promoters and renal cell-specific regulation of the mouse type ha sodium-dependent phosphate cotransporter gene.

小鼠ha型钠依赖性磷酸协同转运蛋白基因的替代启动子和肾细胞特异性调节。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Biochimica et Biophysica Acta 1732・1
• 作者: 長瀬洋之;大田 健;Taketani Y;Sato T;Yamamoto H 他
• 通讯作者: Yamamoto H 他