腎微小循環におけるRhoキナーゼの役割およびその分子機構の検討

Rho激酶在肾微循环中的作用及其分子机制研究

• 批准号: 17790562
• 负责人: 本間 康一郎
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790562/
• 关键词: 腎微小循環; 筋原性収縮反応; Rhoキナーゼ; AMPキナーゼ; 糸球体過剰ろ過; 腎輸入細動脈; 尿細管糸球体フィードバック; nNOS; アデノシン

昨年度の研究にて腎輸入細動脈の自動調節能である筋原性収縮反応と、尿細管糸球体フィードバック反応をin vivoにおいてCCDカメラを用いて可視化することに成功し、その機序について検討したが、本年度は細胞伸展装置を用いて筋原性収縮反応をin vitro実験系で再現することを試みた。背景,目的血管自動調節能である筋原性収縮反応(MYO)は、伸展刺激に対して収縮を示す反応である.我々はMYOのin vitro実験系を確立し、AMPキナーゼ、Rhoキナーゼの関与につき検討した。さらに、肥満モデルであるZucker fatty ratにおける腎輸入細動脈MYOの減弱を以前に報告したが、これに対するAMPキナーゼが関与について検討を加えた。方法シリコン製チャンバー上に血管平滑筋細胞を培養し、細胞伸展装置を用い刺激を加えた細胞を用いて、myosin light chain, AMPキナーゼ,Rhoキナーゼの活性化のマーカーであるMYPT-1のリン酸化抗体を用いwestern blottingにて検討した。Zucker fatty ratにAMPキナーゼの活性化薬(AICAR)を慢性投与し、生体内CCDカメラを用いMYOを観察した。結果細胞伸展刺激後10秒の時点でmyosin light chain、AMPキナーゼ、MYPT-1それぞれのリン酸化の発現亢進が確認された。さらにAICAR投与によりZucker fatty ratの腎輸入細動脈MYOの減弱が一部改善された。考察MYOは伸展刺激後10秒という非常に急速な反応であり、その反応にAMPキナーゼ、Rhoキナーゼが関与していることが示唆された。さらに、AMPキナーゼ活性化薬は糖尿病初期のhyperfiltrationを改善する可能性が考えられた。

Last year's research on autoregulation of renal afferent arterioles was successful in visualizing myogenic contraction in vivo, urinary tubule tubule Background: Objective vascular autoregulation is responsible for myogenic contraction (MYO) response to extensional stimuli. I'm sorry, but I'm sorry. I'm sorry. Zucker fatty rat, kidney input artery MYO attenuation, previous report, AMP clearance, review Methods: Vascular smooth muscle cell culture, cell extension device stimulation, myosin light chain, AMP,Rho, activation of MYPT-1, and Western blotting were used. Zucker fatty rat AMP activation (AICAR) is a chronic injection, and in vivo CCD activation (MYO) is detected. Results Myosin light chain, AMP and MYPT-1 were identified at 10 seconds after cell stretch stimulation. In addition, the MYO of the renal input artery of Zucker fatty rat was reduced and partially improved. 10 seconds after the MYO stretch stimulus, the rapid response time, the response time. The possibility of improving early hyperfiltration in diabetes mellitus was examined.