自己免疫性脳脊髄炎における新規治療薬の開発

自身免疫性脑脊髓炎新治疗药物的开发

• 批准号: 17790594
• 负责人: 中西 恵美
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Kanazawa Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790594/
• 关键词: 実験的自己免疫性脳脊髄炎; トリコスタチンA; 多発性硬化症

1;核内レセプター機能の転写調節機能に必須であるヒストン脱アセチル化酵素(以下HDAC)の阻害剤、その代表であるトリコスタチンA(以下TSA)が近年全身性エリテマトーデス等の臓器特異性自己免疫疾患での治療薬の一つとしての可能性が模索されており、中枢神経系自己免疫疾患の多発性硬化症の治療薬として、実験的自己免疫性脳脊髄炎(以下EAE)の臨床症状の軽減を確認し、同薬剤の免疫修飾作用について継続検討した。2;MOG_<35-55>感作25日目のマウスを灌流固定し、第3腰椎位の脊髄組織切片(6μm)をヘマトキシリン-エオジンにて染色した。脊髄横断面1切片内における炎症浸潤細胞数を計測、両群の脊髄病変の炎症細胞浸潤数を比較評価した。第三腰椎位の腰髄病理切片を作成、TSA未治療のマウスに比してTSA治療群での炎症細胞の軟膜下浸潤細胞数の減少を病理学的に確認した。(未治療マウス1078±71.1対TSA治療マウス666±41.6、P<0.05)3;IFN-γ産生抑制機序を介し、TSAがEAEの臨床症状を改善させた可能性を評価する為、INF-γのpromoter領域に存在するNFAT-依存性の転写活性に対するTSAの作用を評価した。ヒトT細胞のJurkat細胞に、NFAT-luciferase reporter plasmidをトランスフェクションし、(phRG-TK plasmidと共にX-treme Q2)、48時間後にTSA0.05μMあるいは0.5μM、更にバルプロ酸を0.5μM添加、1時澗後にPMAとionomycinを25μMずつ添加、その6時間後にlysateを調整し、firefly luciferase活性を測定の上、各活性をrenilla luciferase活性で補正した。TSA添加では、容量依存的なNFAT転写活性の抑制が確認された。なおバルプロ酸でも有意な抑制を確認したが、TSAに比較すると軽微である事も確認した。4;HDAC阻害剤の加療で、EAEの導入期及び効果期共に治療効果を認め、IFNγの産生抑制と共に、そのromoter領域への用が確認された事は、再発緩解型のみならず、慢性もしくは二次性進行型の多発性硬化症患者への治療効果が期待される。またHDACのclass I属に対する阻害効果を保持するバルプロ酸でも、同様の傾向を確認した事は、抗てんかん薬として汎用される薬剤の新たな治療薬としての可能性を示唆するものであり、治療薬の選択として期待される。

1; A representative inhibitor of HDAC (hereinafter referred to as HDAC), which is essential for the regulation of nuclear function, has been proposed as a possible treatment for systemic autoimmune diseases such as multiple sclerosis. To confirm the reduction of clinical symptoms of autoimmune arthritis (EAE), and to investigate the immune modification effect of the same agent 2;MOG_<35-55>induced 25 days of perfusion fixation, 3 lumbar spine tissue sections (6μm) The number of inflammatory cells in spinal cross-section 1 was measured, and the number of inflammatory cells in spinal disease was compared. Pathological examination of the lumbar spine at the third lumbar level confirmed the decrease in inflammatory cells and subpial infiltration cells in the untreated group compared with the TSA treated group. 3. The mechanism of IFN-γ production inhibition, the possibility of TSA improving clinical symptoms of EAE, the existence of NFAT-dependent transcription activity in INF-γ promoter domain, and the role of TSA were evaluated. In Jurkat cells, NFAT-luciferase reporter plasmid was added at 0.05 μM after 48 hours (phRG-TK plasmid and total X-treme Q2). In addition, TSA was added at 0.5 μ M after 48 hours. PMA and ionomycin were added at 25μ M after 1 hour. Lysate was adjusted after 6 hours. Firefly luciferase activity was determined. Renilla luciferase activity was corrected for each activity. TSA addition was confirmed as a capacity-dependent inhibition of NFAT activity. The TSA comparison was done on purpose. 4. The effect of HDAC inhibitor on the treatment of patients with progressive secondary sclerosis is expected. The class I of HDAC is related to the retention of harmful effects, identification of the same tendency, identification of new therapeutic agents, and indication of the possibility of treatment options.