多発性骨髄腫におけるメルファラン輸送を介した抗癌剤耐性機序の研究

马法兰转运介导的多发性骨髓瘤抗癌耐药机制研究

• 批准号: 17790650
• 负责人: 原田 奈穂子
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790650/
• 关键词: 多発性骨随腫; メルファラン; 抗癌剤耐性; 薬剤輸送ポンプ; CD98; 多発性骨髄腫

骨髄腫細胞株KHM-11においてはトランスフェクション試薬による細胞障害が強く効率の良いsiRNAの導入が困難であることが判明しており、トランスフェクションの実績が豊富である骨髄腫細胞株RPMI8226を使用しLAT1/4F2 heavy chain (4F2hc)の抑制実験を行った。LAT1/4F2 heavy chain (4F2hc)の抑制効果が確認されているStealth^<TM> Select RNAi, SLC3A2-HSS109826 (Invitrogen)をLipofectamine^<TM> 2000(Invitrogen)を用いて濃度250nMで導入したところ、同濃度のnegative control(Stealth^<TM> RNAi Negative Control Medium GC Duplex, Invitrogen)を導入した細胞と比較しCD98(4F2hc)の発現低下が認められた(導入48時間後にフローサイトメトリーにてCD98の発現強度を測定し、siRNA導入細胞でmean fluorescence intensityが平均66.4%低下)。この細胞を用いて14C-Melphalan(Moravek Biochemicals, Inc)の取り込みを測定したところ、トランスフェクション試薬のみ暴露した細胞とnegative controlでは有意差を認めなかったが(p=0.61)、siRNA導入細胞ではnegative controlと比較し14C-Melphalanの取り込みが73.2%と有意に低下していた(p=0.005)。この結果より骨髄腫細胞株RPMI8226においてメルファランの取り込みはLAT1/4F2 heavy chain (4F2hc)を介して行われていることが示され、このため4F2hcの発現低下がメルファラン耐性の一因となると考えられた。

It is difficult to introduce siRNA into osteoma cell line KHM-11 with high efficiency in response to cell dysfunction test. It is difficult to identify the inhibition effect of LAT1/4F2 heavy chain (4F2hc) on osteoma cell line RPMI8226. The inhibitory effect of LAT1/4F2 heavy chain (4F2hc) was confirmed by Stealth^<TM>Select RNAi, SLC3A2-HSS109826 (Invitrogen) and Lipofectamine^<TM>2000(Invitrogen) when introduced into RNAi cells at a concentration of 250nM. The same concentration of negative control(Stealth^<TM>Negative Control Medium GC Duplex, Invitrogen) was introduced into RNAi cells and the mean fluorescence intensity of CD98 (4F2hc) was determined to be lower than that of CD98 (48 hours after introduction). The expression of siRNA in 14C-Melphalan (Moravek Biochemicals, Inc.) cells was measured by negative control (p=0.61), and the expression of siRNA in 14C-Melphalan cells was measured by negative control (p=0.005). The results showed that the osteoma cell line RPMI8226 had a low tolerance to LAT1/4F2 heavy chain (4F2hc).

项目成果

EBM血液疾患の治療 2008-2009

2008-2009 年 EBM 血液疾病的治疗

• 发表时间: 2007
• 作者: 押味和夫;他編集
• 通讯作者: 他編集

リツキシマブの間欠投与で3年間にわたる病勢コントロールが可能であった原発性マクログロブリン血症

原发性巨球蛋白血症，间歇性利妥昔单抗治疗可控制病情 3 年

• 发表时间: 2007
• 作者: Shiozaki K;Harada N. et al.;Shikiko Ueno;原田 奈穂子
• 通讯作者: 原田 奈穂子

Microarray Analysis of PU.1-Induced Growth Arrest and Apoptosis of Myeloma Cell Lines.

PU.1 诱导的骨髓瘤细胞系生长停滞和凋亡的微阵列分析。

• 发表时间: 2007
• 作者: Shiozaki K;Harada N. et al.;Shikiko Ueno
• 通讯作者: Shikiko Ueno

Antiangiogenic chimeric anti-endoglin (CD105) antibody: pharmacokinetics and immunogenicity in nonhuman primates and effects of doxorubicin

• DOI: 10.1007/s00262-005-0691-4
• 发表时间: 2006-02-01
• 期刊: CANCER IMMUNOLOGY IMMUNOTHERAPY
• 影响因子: 5.8
• 作者: Shiozaki, K;Harada, N;Seon, BK
• 通讯作者: Seon, BK