新開発の走化性測定装置を用いた好中球・好酸球の遊走制御分子の探索と新薬開発

使用新开发的趋化性测量装置寻找控制中性粒细胞和嗜酸性粒细胞迁移的分子并开发新药

• 批准号: 17790670
• 负责人: 山内 明
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790670/
• 关键词: 細胞走化性; アレルギー; 炎症; 新薬開発; ケモカイン; ケモカイン受容体; 好中球・好酸球; タクシスキャン法; 炎症・アレルギー; 受容体会合分子; 走化性制御; KKチャンバー; TAXIScan

1.平成18年度は平成17年度に引き続き、好中球の走化性制御を目的としてCXCR1,CXCR2の細胞内C末端領域に結合する分子のスクリーングの為にイーストTwoハイブリッドの系の確立を試みた。しかしながらPCRで増幅したDNAをベクターに挿入するところでライゲーションされないという問題が生じた。このためイーストTwoハイブリッド系を確立する事ができなかった。原因を調べるため試行錯誤したが、解決できず、CXCR1,CXCR2の系は一時保留とした。別のアプローチによる系の確立が急務である。2.次に好酸球の走化性を制御すること目的として、Eotaxinに対するケモカイン受容体CCR3における細胞内C末端領域配列に関してデータベースを用いて検索し、プライマーを設定してcDNAから細胞内C末端領域配列をPCRで増幅し、得られたC末端領域配列をイーストTwoハイブリットの系に組み込んだ。今後、イーストTwoハイブリッド法にてスクリーニングを行う予定である。3.細胞遊走実験において従来法であるボイデン法と新しい走化性測定装置タクシスキャン(KKチャンバー)を比較した。事前の予想通りボイデン法では、細胞株を用いても実験日/実験者間でデータにバラツキがあり定量性はあるものの安定した値が得られ難かった。タクシスキャン法では遊走細胞株の速さや方向性を定量することができ安定した値が得られた。末梢血由来の好中球や好酸球では速さと方向性に個人差がみられ、また遊走を刺激するリガンドによっても有意な差がみられた。このことは、in vitroで薬物の効果を判定する際は勿論、in vivoで評価する際にも参考になると考えられた。

1. In Pingcheng 18, in Pingcheng 17, in order to control the movement of the ball, the aim is to determine the intracellular C-terminal domain of the CXCR1,CXCR2 in combination with the molecular marker, which is responsible for the development of the Two system. This is the first time that the PCR has been released. This is the first time you have a problem with your computer. I don't know if I want to make sure that I'm sorry. I'm sorry. I don't know. I don't know. The reason is that the error message is not correct, the error is resolved, and the CXCR1,CXCR2 system is reserved for the time being. Do not ask to make sure that you have an urgent account. two。 The secondary acid globule is used to control the formation of the target, the Eotaxin, the receiver, the recipient, the recipient From now on, you will need to know if you are going to make a decision in the future. 3. The new equipment for determining the mobility of KK cells is to compare the results of the new method. In advance, try to figure out how to do this in advance, and the cell lines were used to determine the number of people who were killed on the first day of the week. The speed of the cell line, the direction, the quantity, the diazepam, the diazepam, the speed, the speed, the direction, the speed, the speed, the direction, the speed, the direction, the direction, the speed, the direction, the direction, the speed, the speed, the direction, the direction, the speed, the speed, the direction, the direction, the speed, the speed, the direction, the direction, the speed, the speed, the direction, the speed, the speed, the direction, the direction, the speed, the speed, the direction, the speed, the direction, the direction, the speed, the speed, the direction, the direction, the speed, the speed, the direction, the speed, the speed, the direction, the direction, the speed, the speed, the direction, the direction, the speed, the The cause of peripheral blood is "good medium ball", "good acid ball", "speed", "direction", "personal difference", "direction", "personal difference", "walk", "stimulation", "intentional", "bad". Please tell me what to do, in vitro what you want to know, and what you need to know. If you want to make a decision, you will need to know if you want to make a decision. If you want to make an international reference, you will not be able to do so.