チトクロームc酸化酵素欠損良性乳児型の分子病態解析

良性婴儿型细胞色素c氧化酶缺乏症的分子病理学分析

• 批准号: 17790738
• 负责人: 三牧 正和
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790738/
• 关键词: チトクロームc酸化酵素欠損症; 良性乳児型; ミトコンドリアDNA; 転移RNA; アミノアシル化; ミトコンドリア病; アミノアシンル化

チトクロームc酸化酵素欠損良性乳児型の6例にミトコンドリアDNA上のtRNA-Glu(グルタミン酸特異的転移RNA)領域の同一塩基の点変異を見いだした。tRNA-Gluはaminoacyl acceptor stemの末端にCCA配列が付加され、アンチコドンの転写後修飾をうけコドンの認識能力を獲得し、アミノアシル化転移酵素によりglutamateをチャージしてアミノアシル化が完成する。患者ではいずれかの過程に異常が生じていると考え、まず患者生検筋のtRNA量が低下していることを明らかにした。またアミノアシル化には異常がないことをacid PAGE等で示した。さらにtRNAをRNaseで部分消化しDNA変異が実際にtRNAの配列異常をもたらしていることを確認した。本年度は症例数をさらに増やしたうえで変異を確認し、同変異がtRNAの生合成、機能発現にもたらす異常を検出するために、以下の検討を行った。1.Acryloylamino phenyl mercuric chloride gelを用いたノーザンブロットにより、tRNAのアンチコドン修飾には異常がないことを確認した。2.培養細胞を用いて、メチオニンラベルよるタンパク合成能解析を行い、電子伝達系タンパクの異常を示唆する結果をえた。以上より、発見した変異はアンチコドン修飾には影響を与えず、変異のもたらすtRNAの量的減少によりタンパク合成能の異常をきたすことが病因となっていると考えた。自然軽快する機序については検討中であるが、チトクロームc酸化酵素のアイソフォームの乳児型から成人型への変化の関与を想定している。

チ ト ク ロ ー ム c acidification enzyme owe damage of 6 cases of benign breast type where の に ミ ト コ ン ド リ ア DNA の tRNA - Glu (グ ル タ ミ ン acid specific planning move RNA) field の same salt base の points - see different を い だ し た. End of the tRNA - Glu は aminoacyl acceptor stem の に CCA with column が plus さ れ, ア ン チ コ ド ン の planning modification after writing を う け コ ド ン の cognition を し, ア ミ ノ ア シ ル change planning shift enzyme に よ り glutamate を チ ャ ー ジ し て ア ミ ノ ア シ ル change が complete す る. Patients で は い ず れ か の に abnormal が raw じ て い る と え test, ま ず patients born 検 reinforcement の tRNA low quantity が し て い る こ と を Ming ら か に し た. Youdaoplaceholder0 またア ノアシ ノアシ またア に に exception がな がな た とを とをacid PAGE et al. Youdaoplaceholder5 show で た. さ ら に tRNA を RNase で partly digested し DNA - different が be interstate に tRNA の go abnormal を も た ら し て い る こ と を confirm し た. This year は disease cases を さ ら に raised や し た う え で - different を confirm し, with variations different が tRNA の biosynthesis and function 発 now に も た ら す abnormal を 検 out す る た め に, the following の 検 line for を っ た. 1. Acryloylamino phenyl mercuric chloride gel を with い た ノ ー ザ ン ブ ロ ッ ト に よ り, tRNA の ア ン チ コ ド ン modified に は abnormal が な い こ と を confirm し た. 2. The cultured cells を with い て, メ チ オ ニ ン ラ ベ ル よ る タ ン パ ク synthetic line can parse を い, electronic 伝 da タ ン パ ク の abnormal を in stopping す る results を え た. See above よ り, 発 し た - different は ア ン チ コ ド ン modified に は influence を and え ず, - different の も た ら す tRNA decreases に の よ り タ ン パ ク synthesis can の abnormal を き た す こ と が causes と な っ て い る と exam え た. Natural 軽 fast す る machine sequence に つ い て は 検 beg in で あ る が, チ ト ク ロ ー ム c acidification enzyme の ア イ ソ フ ォ ー ム の milk type where か ら adult type へ の variations change の masato and を scenarios し て い る.