悪性神経膠腫におけるMGMTの蛋白活性・発現解析による抗癌剤耐性の再評価

恶性胶质瘤中MGMT蛋白活性及表达分析重新评价抗癌耐药性

• 批准号: 17790982
• 负责人: 大西 晶子
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Saitama Medical University (2006)National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East (2005)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790982/
• 关键词: 癌; 酵素; トランスレーショナルリサーチ; 脳・神経; 薬剤反応性

36例の膠芽腫検体を用いて、MGMT酵素活性測定,Western blot(W/B)法によるMGMT蛋白発現量測定,免疫染色による陽性率,MGMT promoter領域のMethylation Specific PCR(MSP)によるメチル化検出を行った.結果MGMT酵素活性値とW/Bによる蛋白発現量には相関が認められ,酵素活性が高い検体では蛋白発現も高地となった(P=0.007).また,メチル化を有する検体でW/Bによる蛋白発現量が低く,メチル化のない検体で蛋白発現量が高かった(P=0.034).酵素活性が低い,蛋白発現量が低い,メチル化を有する症例で他方と比較して予後良好である傾向を認めたが、統計学的有意差は認められなかった.これまで,悪性神経膠腫の予後因子・治療感受性因子として,アルキル化剤耐性に関与するDNA修復酵素であるMGMTの発現が示唆され,大規模臨床試験の付随研究においてもpromoter領域のメチル化を有する事が,予後良好因子であり,治療感受性因子であることが示された.しかし,本研究で行ったように,実際の酵素活性値を測定することは,MGMTの腫瘍内での機能を直接評価しており,測定方法が煩雑である酵素活性の代替指標を明らかにすることは意義深いと考えられる.本研究の結果,MGMT酵素活性とW/B法による蛋白発現量の間に良い相関が得られ,代替指標となり得ると考えられた.予後解析においては,初期治療に臨床試験で示されたtemozolomide併用放射線治療を行っていない事,症例数が十分でないことなども影響し,MGMTの発現の違いにより,差異が検出されなかった可能性も考えられた.

36 cases of colloid tumor were detected by PCR, MGMT enzyme activity assay,Western blot(W/B) method, MGMT protein production assay, immunostaining positive rate, Methylation Specific PCR(MSP) in MGMT promoter field. Results: The enzyme activity of MGMT was higher than that of W/B and protein production was higher than that of W/B (P=0.007). In addition, the protein expression level of the W-B ratio in the samples was lower than that in the samples with the same concentration (P=0.034). Enzyme activity is low, protein production is low, and there is a tendency to compare others with others. The development of MGMT, a DNA repair enzyme associated with neuroblastoma, and the development of a gene therapy susceptibility factor in large clinical trials and follow-up studies in the promoter domain are also indicated. In this study, the enzyme activity values were measured in real time, and the function of MGMT in tumors was directly evaluated. The measurement method was complicated, and the enzyme activity was replaced by index. The results of this study showed that there was a good correlation between MGMT enzyme activity and protein production by W/B method. After analysis, the clinical trial showed that temozolomide was used in combination with radiation therapy, and the number of cases was very high. The occurrence of MGMT was different.