MAGとP75受容体の取り込みによるNGFの生存シグナル伝達の脱感作機構の解明

通过摄取 MAG 和 P75 受体阐明 NGF 存活信号的脱敏机制

基本信息

  • 批准号:
    17790963
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.18万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2005
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2005 至 2006
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

一旦損傷した中枢神経の軸索は成熟動物では再生不能であるが、その原因としてミエリン由来軸索伸展阻害因子の存在が指摘されており、現在までに3種類の蛋白が単離されている。その一つであるmyelin-associated glycoprotein(MAG)は、中枢神経損傷時に、一回膜貫通型構造の細胞外ドメインがプロテアーゼにより切断され、損傷周囲部に溶出してくることがわかっているが、その詳細な機能は全く不明である。私はIn vitroにおいて免疫染色法にて、MAGがその受容体であるp75NTRと共に、後根神経節細胞の神経軸索内に取り込まれることを見い出した。また、p75NTRを蛍光で標識した後に、神経細胞をMAGで刺激し、蛍光画像を経時的に観察した。蛋白が受容体と共に、軸索からもとりこまれ、軸索から細胞体に運ばれることを証明した。また、MAGの刺激により、smallGTPaseのRap1が活性化され、それが神経細胞の生存維持と深く関わっていることをTUNEL法を用いて証明した。また、HEK293細胞及び、神経細胞を用いた検討により、p75NTRは活性型のRap1と結合することが証明された。また、後根神経節細胞と坐骨神経を一塊にして取り出し、培養することにより、軸索輸送に関して詳細に検討した。In vivoにおいても、p75NTRが軸索輸送され、また、Rap1Aの活性化が神経細胞の生存維持と深く関わっていることを証明した。このことにより、MAGは軸索伸展阻害作用と共に、神経細胞の生存機能に深く関わっていると考えられた。
Once the axons of the central nervous system are damaged, the mature animals are unable to regenerate due to the presence of axonal extension inhibition factors. When the central nervous system is damaged, a membrane-penetrating structure of extracellular membrane is cut off, and the damaged peripheral part is dissolved. In vitro immunostaining, MAG and receptor p75NTR were detected in the axons of posterior ganglion cells. The p75NTR was detected after stimulation of neurons and after imaging. Protein receptor, axons, axons, cell bodies The activation of RAP1 in MAG and MAG was demonstrated by TUNEL method. The binding of p75NTR to RAP1 was demonstrated in HEK293 cells and neurons. A detailed discussion of the relationship between the extraction, culture, and axonal transport of postganglionic cells and sciatic nerves is presented. In vivo, p75NTR plays an important role in axonal transport, and activation of Rap1A plays an important role in maintenance of neuronal survival. The role of MAG in axonal extension is closely related to the survival function of neurons.

项目成果

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