遺伝子組換えマウスを用いた尿路結石形成に関わるオステオポンチン制御部位と機能解析

使用转基因小鼠进行尿路结石形成中涉及的骨桥蛋白调节位点和功能分析

• 批准号: 17791084
• 负责人: 秋田 英俊
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791084/
• 关键词: 尿路結石; シュウ酸カルシウム; グリオキシル酸; モデルマウス; オステオポンチン; ノックアウトマウス; トランスジェニックマウス

オステオポンチン(OPN)遺伝子組換えマウスの実験コントロールとして、60〜100mg/kgのグリオキシル酸を連日腹腔内投与することにより、安定した腎結石形成を得られることを確認した。この結石形成は投与3日目より確認され、成分分析でもシュウ酸カルシウム1水和物と、ヒト尿路結石成分と同様であることを確認した。OPN発現解析では、投与3日目より発現増大し、免疫染色でも結石内にOPNが含まれていることが確認された。以上の結果を論文報告した。(Urol Res. 2007 Apr ;35 (2):89-99. Epub 2007 Feb 14.)OPNノックアウトマウスを作成し、上記モデルマウス(wild-type)と同様の手法で結石を形成させた。結石形成量は、wild-typeマウスと比較して少なかった。X線回折による成分分析では、wild-typeと同様にシュウ酸カルシウム1水和物であった。しかし偏光顕微鏡による結晶形態観察では、wild-typeでは大きな花弁状構造を、ノックアウトマウスでは、小さな砂状で均一な構造であった。(平成19年5月論文投稿予定)。3種類のOPNプロモーター領域(-5kb,-3kb,-1.5kb)にGFP発現遺伝子を結合させたtransgeneを導入したトランスジェニックマウスに対し、同様にグリオキシル酸を投与した。腎組織におけるGFP発現より、結石形成に関わるOPN発現を制御するプロモーター領域は-3〜-1.5kbの範囲に存在する可能性が確認された。追試実験の後、平成19年度中に論文投稿予定である。

オ ス テ オ ポ ン チ ン (OPN) heritage 伝 subgroups in え マ ウ ス の be 験 コ ン ト ロ ー ル と し て, 60 ~ 100 mg/kg の グ リ オ キ シ ル acid を days cast with intraperitoneal す る こ と に よ り, stable し た kidney stones form を must ら れ る こ と を confirm し た. こ の lithogenesis は cast with 3 orders よ り confirm さ れ, composition analysis で も シ ュ ウ acid カ ル シ ウ ム 1 water and と, ヒ ト urinary stones composition と with others で あ る こ と を confirm し た. OPN 発 now parse で は, cast and 3 orders よ り 発 now raised large し, immune dyeing で も calculi in に OPN が containing ま れ て い る こ と が confirm さ れ た. The above <s:1> results を paper report た た. (Urol Res. 2007 Apr; 35 (2) : 89-99. Epub 2007 Feb 14.) OPN ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス を make し, written モ デ ル マ ウ ス (wild) -type と with others の technique で calculi を form さ せ た. The amount of stone formation and wild-type ウスと ウスと is less than that of て て な った った った. X-ray refolding による component analysis で で, wild-typeと identical にシュウ acid カ シウム シウム1 water and substances であった. し か し polarization 顕 micromirror に よ る crystal morphology 観 examine で は, wild -type で は big き な flower chemical structure を, ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス で は, small さ な sand shape で な uniform structure で あ っ た. The submission of the paper was confirmed in May of Heisei 19. 3 kinds の OPN プ ロ モ ー タ ー field (5 KB, - 3 KB, 1.5 KB) に GFP 発 now heritage 伝 son を combining さ せ た transgene を import し た ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス に し, with others in seaborne に グ リ オ キ シ ル acid を cast with し た. Kidney に お け る GFP 発 now よ り, lithogenesis に masato わ る OPN 発 now を suppression す る プ ロ モ ー タ は ー field - 3 ~ 1.5 KB の van 囲 に exist す る possibility が identify さ れ た. In the second year of Heisei 19, the paper に was submitted to である.

项目成果

Successful formation of calcium oxalate crystal deposition in mouse kidney by intraabdominal glyoxylate injection

• DOI: 10.1007/s00240-007-0082-8
• 发表时间: 2007-04-01
• 期刊: UROLOGICAL RESEARCH
• 作者: Okada, Atsushi;Nomura, Shintaro;Kohri, Kenjiro
• 通讯作者: Kohri, Kenjiro