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卵胞周囲への莢膜細胞出現メカニズムの研究

卵泡周围荚膜细胞出现机制的研究

基本信息

批准号：
17791109
负责人：
折坂誠
金额：
$ 2.11万
依托单位：
University of Fukui
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

【目的】初期の卵胞発育において、卵胞がゴナドトロピン反応性を獲得する過程で鍵を握る「卵胞周囲への莢膜細胞層出現」メカニズムについて、卵巣局所とくに顆粒膜細胞および卵からのparacrine調節機構の解明を試みた。【成績1】人工卵胞壁モデルである"コラーゲン膜両面培養装置"を用いて、顆粒膜細胞が卵巣間質細胞(莢膜細胞の前駆細胞)の機能分化に及ぼす影響を検討した。(1)顆粒膜細胞との共培養により、間質細胞内の脂肪滴やミトコンドリアが増加し、ステロイド産生細胞の特徴が顕著となった。(2)顆粒膜細胞との共培養により、間質細胞のアンドロゲン産生能は亢進した。(3)卵巣より単離直後の間質細胞には、LH受容体(莢膜細胞のマーカー)のmRNA発現を認めなかった。顆粒膜細胞との共培養により、皮質細胞にLH受容体のmRNA発現が誘導された。しかし、この現象は、髄質細胞には観察されなかった。(4)顆粒膜細胞により皮質細胞に誘導されたLH受容体が、機能を有するか否かを検討した。共培養された皮質細胞は、hCG刺激に用量依存性に反応し、cAMPとアンドロゲン産生量が増加した。【成績2】卵特異的な成長因子であるGrowth differentiation Factor-9(GDF-9)が、莢膜細胞の機能分化に及ぼす影響を、卵局所での遺伝子ノックダウン・システムとin vitro卵胞培養系を用いて検討した。(1)GDF-9は黄膜細胞由来のアンドロゲン産生を促進するが、GDF-9をノックダウンするとアンドロゲン産生は抑制された。(2)GDF-9は莢膜細胞でアンドロゲン産生に中心的な役割を担うCYP17AlのmRNA発現を促進するが、GDF-9をノックダウンするとCYP17Al mRNA発現は抑制された。【結論】顆粒膜細胞および卵からのparacrine調節が、卵巣皮質由来の間質細胞を莢膜細胞に機能分化させる可能性が示唆された。この現象は、卵胞がゴナドトロピンに対する反応性を獲得するメカニズムの一つと推測された。

[Objective] To explore the mechanism of granular membrane cells and paracrine regulation in the early stage of egg development. [Result 1] To investigate the effects of the use of artificial egg cell wall culture equipment on the functional differentiation of granular membrane cells and egg stromal cells (capsular cells and precursor cells) (1)During co-culture of granular membrane cells and stromal cells, fat droplets and micronuclei in stromal cells increased, and the characteristics of stard-producing cells became more apparent. (2)Granular membrane cells co-culture, stromal cells and the production of the enzyme can be enhanced. (3)The mRNA expression in the stromal cells after egg separation is recognized by LH receptors (capsular cells). mRNA expression of LH receptor was induced in granulosa cells and cortical cells in co-culture. The phenomenon of "" and "" is observed by the cytoplasmic cells. (4)Granular membrane cells are induced by LH receptors, and their functions are discussed. Cortical cells co-cultured with hCG increased in response to hCG stimulation dose. [Result 2] Egg specific growth Factor-9(GDF-9) was used to investigate the effects of functional differentiation on capsular cells and in vitro egg culture systems. (1)GDF-9 promotes and inhibits the production of cell derived proteins in luteal membrane cells. (2) CYP17Al mRNA expression was promoted by GDF-9 in the production center of GDF-9 capsule cells, and inhibited by GDF-9 in the production center of GDF-9 capsule cells. [Conclusion] It is possible that paracrine regulation of granulosa membrane cells and functional differentiation of capsular cells derived from egg cortex are regulated. This phenomenon is caused by the fact that the egg cells have been found to be resistant to radiation and are presumed to be resistant to radiation.