ヒト卵巣顆粒膜細胞におけるERK、Akt活性化の機序の解明

阐明人卵巢颗粒细胞 ERK 和 Akt 激活机制

基本信息

  • 批准号:
    17791105
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.47万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2005
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2005 至 2006
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

卵巣顆粒膜細胞にはゴナドトロピン受容体が発現しており、下垂体から分泌されるFSH, LHといったゴナドトロピンに結合することにより細胞内へシグナルを伝達する。その結果、卵胞発育や排卵、黄体機能維持といった卵巣の主な機能が制御されていると考えられている。顆粒膜細胞におけるシグナル伝達経路の解析をするにあたり、細胞の入手が容易であるラット初代培養系での研究が先行していた。一方、ヒト細胞においては実験モデルの設定が難しいことから検討が進んでいないのが現状である。そこで今回われわれはヒト顆粒膜細胞腫由来の細胞株であるKGN細胞にFSH受容体を一過性遺伝子導入する実験系を確立し、この系を用いてヒト卵巣顆粒膜細胞におけるゴナドトロピン受容体活性化にともなうシグナル伝達経路の解析を試みた。KGN細胞にヒトFSH受容体をリポフェクション法で遺伝子導入することにより過剰発現を試みた。125-I FSHを用いた結合実験により内因性の受容体以外に遺伝子導入によって発現したと考えられた受容体が検出された。導入するDNA量などのリポフェクション法に遺伝子導入の条件を最適化し、もっとも効率が高い条件を設定した。遺伝子導入によって発現したFSH受容体に機能があるかを検討するため、FSHによって遺伝子導入細胞を刺激し、セカンドメッセンジャーである細胞内cAMP量を測定した。遺伝子導入細胞において細胞内cAMP産生が増加することが確認され、発現受容体が機能を有することが確認された。今後、この系を用いヒト顆粒膜細胞におけるERK, Aktといった細胞増殖やアポトーシス回避のシグナル伝達経路の詳細な解析を進める予定である。
Egg 巣 granular cell membrane に は ゴ ナ ド ト ロ ピ ン by let body が 発 now し て お り, pituitary か ら secretion さ れ る FSH, LH と い っ た ゴ ナ ド ト ロ ピ ン に combining す る こ と に よ り intracellular へ シ グ ナ ル を 伝 da す る. そ の results, follicle 発 yukon や ovulation and luteal function maintain と い っ た eggs 巣 の main な function が suppression さ れ て い る と exam え ら れ て い る. Granular cell membrane に お け る シ グ ナ ル 伝 da 経 road の parsing を す る に あ た り, easy of cell の が で あ る ラ ッ ト original training department で の research が first し て い た. Party, ヒ ト cells に お い て は be 験 モ デ ル の set が difficult し い こ と か ら beg が 検 into ん で い な い の が status quo で あ る. そ こ で today back わ れ わ れ は ヒ ト particles membrane cells swollen origin の cell lines で あ る KGN に FSH cells was observed in the capacity of body を posthumous son 伝 import す る be 験 を established し, こ の is を with い て ヒ ト eggs 巣 granular cell membrane に お け る ゴ ナ ド ト ロ ピ ン by let body activeness に と も な う シ グ ナ ル 伝 da 経 road の parsing を try み た. KGN cells に ヒ ト FSH by let body を リ ポ フ ェ ク シ ョ ン method で heritage 伝 son import す る こ と に よ り through turning 発 を now try み た. 125 - I FSH を with い た combination be 験 に よ り endogenous の by let body outside に heritage 伝 son import に よ っ て 発 now し た と exam え ら れ た by let body が 検 out さ れ た. Import す る DNA quantity な ど の リ ポ フ ェ ク シ ョ ン method に heritage 伝 son import を の conditions optimization し, も っ と も sharper rate が を set the condition of high い し た. Posthumous son 伝 import に よ っ て 発 now し た FSH function of the capacity of body に が あ る か を beg す 検 る た め, FSH に よ っ て heritage 伝 を import cells stimulate し, セ カ ン ド メ ッ セ ン ジ ャ ー で あ る determination of intracellular cAMP quantity を し た. Heritage 伝 import cells に お い て cAMP in cells produce が raised plus す る こ と が confirm さ れ, 発 now with let body が function を have す る こ と が confirm さ れ た. In the future, こ の is を with い ヒ ト granular cell membrane に お け る ERK and Akt と い っ た cells raised colonization や ア ポ ト ー シ ス avoid の シ グ ナ ル 伝 of detailed analytical を な の 経 road into め る designated で あ る.

项目成果

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专著数量(0)
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会议论文数量(0)
专利数量(0)
排卵と内分泌攪乱物質
排卵和内分泌干扰物
  • DOI:
  • 发表时间:
    2006
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Ohmichi M;Hayakawa J;et al.;Makoto Orisaka;Makoto Orisaka;Makoto Orisaka;Takashi Hirakawa;平川隆史
  • 通讯作者:
    平川隆史
Effect of 2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-p-Dioxin on the Expression of Gonadotropin Receptors in Ovarian Granulosa Cells.
2,3,7,8-四氯二苯并-对二恶英对卵巢颗粒细胞促性腺激素受体表达的影响。
内分泌攪乱物質と女性機能
内分泌干​​扰物与女性功能
  • DOI:
  • 发表时间:
    2006
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Ohmichi M;Hayakawa J;et al.;Makoto Orisaka;Makoto Orisaka;Makoto Orisaka;Takashi Hirakawa;平川隆史;平川隆史
  • 通讯作者:
    平川隆史
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    岩瀬 明

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