癌関連遺伝子のDNAメチル化異常を指標とした子宮体癌の早期診断と治療戦略の構築

以癌症相关基因DNA甲基化异常为指标的子宫内膜癌早期诊断及治疗策略制定

• 批准号: 17791135
• 负责人: 阪埜 浩司
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791135/
• 关键词: 子宮体癌; DNAメチル化; hMLH1; 癌関連遺伝子; DNAメチル化異常

【方法】癌においてDNA異常メチル化によって不活化される遺伝子はDNA修復、細胞接着、シグナル伝達、細胞周期関連など極めて多彩である。我々はIRBの承認と、患者の同意を得た上で、子宮体癌56例(類内膜腺癌46例、腺扁平上皮癌10例)、異型子宮内膜増殖症(AEH)14例および正常内膜27例由来の細胞診液状検体97例を用いて、hMLH1、E-cadherin、APC、p16、RAR-6、CHER遺伝子の計6種の癌関連遺伝子の異常メチル化を解析した。細胞診液状検体よりDNAを抽出し、亜硫酸水素ナトリウム処理し、DNA上の非メチル化シトシンをウラシルに変換させる。各遺伝子のプロモーター領域のCpGアイランドの塩基配列から作成したメチル化特異的および非メチル化特異的プライマーセットを用いてPCR反応を行い、各遺伝子のプロモーター領域の異常メチル化を解析した(MSP法)。異常メチル化を示した検体においては、その遺伝子の発現低下を組織において免疫組織化学染色法にて検討した。【成績】解析した97例の細胞診検体すべてでMSP法による解析は可能であった。子宮体癌症例の44.6%にhMLH1、22.0%にAPC、14.0%にE-cadherin、13.3%にCHFRの異常高メチル化を認めた。hMLH1およびE-cadherinに異常メチル化が認められた症例は、有意にタンパク発現が低下していた(hMLH1:p<0.01 E-cadherin:p<0.05)。また、CHFRの異常メチル化は低分化型腺癌の28.6%に検出され、高分化型、中分化型に比べ有意に高頻度であった(p<0.05)。一方、p16の異常メチル化は検出されなかった。また、AEHの14.3%にhMLH遺伝子の異常メチル化を認めた。しかしながら、正常子宮内膜には6種の癌関連遺伝子の異常メチル化は認められなかった。子宮内膜の発癌過程において、正常内膜には認められない特定の癌関連遺伝子の異常メチル化が認められ、その中でもhMLH1遺伝子の異常メチル化が最も高頻度であり、子宮体癌の初期病変であるAEHにおいても認められたことから、hMLH1遺伝子の異常メチル化を分子指標とした微量検体による癌の存在診断や発癌のリスク診断の可能性が示唆された。

[Methods] Cancer DNA abnormality, DNA inactivation, DNA repair, cell adhesion, cell cycle correlation, and cell cycle differentiation 56 cases of endometrial carcinoma (46 cases of endometrial adenocarcinoma, 10 cases of squamous cell carcinoma), 14 cases of atypical endometrial hyperplasia (AEH) and 27 cases of normal endometrium were analyzed for abnormal differentiation of 6 cancer-related genes, including hMLH1, E-cadherin, APC, p16, RAR-6 and CHER genes. DNA extraction from cell diagnostic fluid, sulfate treatment, and DNA modification The CpG base alignment of each gene in the domain of the gene was determined by PCR and the abnormal pattern of each gene in the domain of the gene was analyzed (MSP method). Abnormal histochemical staining was used to detect the presence of low levels of DNA in tissues. The analysis of 97 cases of cell diagnosis was possible by MSP method. 44.6% of uterine cancer cases were identified with hMLH1, 22.0% with APC, 14.0% with E-cadherin, and 13.3% with CHFR. hMLH1:p<0.01 E-cadherin:p<0.05). CHFR abnormalities were detected in 28.6% of poorly differentiated adenocarcinomas, and more frequently in well-differentiated and moderately differentiated adenocarcinomas than in intentional adenocarcinomas (p<0.05). A side, p16 and abnormal change in the color of the film. 14.3% of AEH and 14.3% of hMLH are abnormal. 6 kinds of carcinoma-related genes in normal endometrium Endometrial cancer development process, normal endometrium, abnormal changes in specific cancer-related genes, abnormal changes in hMLH1 genes, abnormal changes in early stage of uterine cancer, abnormal changes in early stage of uterine cancer, abnormal changes in early stage of uterine cancer, abnormal changes in early stage of uterine cancer hMLH1 gene expression abnormalities, molecular markers, micromarkers, cancer diagnosis, and cancer detection possibilities

项目成果

Hypermethylation in the p16 promoter region in the carcinogenesis of endometrial cancer in Japanese patients.

日本患者子宫内膜癌发生过程中 p16 启动子区域的高甲基化。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Anticancer Res. 26
• 作者: Yanokura M;Banno K;et al.
• 通讯作者: et al.

Successful analysis of anticancer drug sensitivity by CD-DST using pleural fluid and ascites from patients with advanced ovarian cancer.

使用晚期卵巢癌患者的胸水和腹水通过 CD-DST 成功分析抗癌药物敏感性。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Anticancer Res 95(4)
• 作者: Kawaguchi M;Banno K et al.
• 通讯作者: Banno K et al.

Hypermethylation in the p16 promoter region on the carcinogenesis of endometrial cancer in Japanese

p16启动子区高甲基化与日本子宫内膜癌的发生有关

• 发表时间: 2006
• 期刊: Anticancer Res 26(2)(印刷中)
• 作者: Yanokura M;Banno K et al.
• 通讯作者: Banno K et al.

Relationship of aberrant DNA hypermethylation of CHFR with sensitivity to taxanes in endometrial cancer.

• DOI: 10.3892/or.17.1.41
• 发表时间: 2007
• 期刊: Oncology reports
• 影响因子: 4.2
• 作者: Megumi Yanokura;K. Banno;M. Kawaguchi;N. Hirao;A. Hirasawa;N. Susumu;K. Tsukazaki;D. Aoki

臨床腫瘍内科学入門

临床肿瘤学导论

• 发表时间: 2005
• 作者: Yamagami W;Banno K;et al.;金倉 譲
• 通讯作者: 金倉 譲