レンズ蛋白による網膜障害防御機構の解明

阐明晶状体蛋白对视网膜损伤的保护机制

• 批准号: 17791226
• 负责人: 新井 郷子
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791226/
• 关键词: 網膜虚血-再灌流障害; アポトーシス; クリスタリン; 網膜虚血再灌流障害; crystallin

ラット網膜虚血-再灌流障害モデルを用いて、正常網膜および再灌流後6、12、24時間後の凍結切片を作成し、crystallin familyの局在を免疫染色で確認した。_A3/A1-crystallin、_C-crystallinの網膜における発現部位は、免疫組織学的に同定することはできなかった。Heat shock proteinとして知られている_B-crystallinは、再灌流後12時間でミュラー細胞に発現が認められた。_B2-crystallinは、虚血再灌流後6〜12時間で網膜神経節細胞層および内顆粒層の細胞を中心に発現が認められた。網膜神経節細胞のアポトーシスが、虚血再灌流後6〜12時間にかけて起こることが知られているため、_B2-crystallinに着目してさらに研究を進めた。ウェスタンブロッティングによって_B2-crystallinタンパク発現量の変化を検索したところ、正常網膜においてもわずかな発現がみられたが、虚血再灌流後6時間から発現が増加し、12時間でピークを示した。また、RT-PCRにより遺伝子の発現量を解析した結果でも、同様な結果が認められた。そして、虚血再灌流後24時間の網膜神経節細胞層および内顆粒層にTUNEL染色陽性細胞が認められたため、_B2-crystallin特異的siRNAをラット硝子体に投与して、虚血再灌流後の網膜について分析した。ウェスタンブロッティングで_B2-crystallinタンパク発現は、発現がピークであるはずの虚血再灌流後12時間で抑制されており、虚血再灌流後24時間の網膜神経節細胞層および内顆粒層のTUNEL染色陽性細胞は、減少していた。以上の結果より、_B2-crystallinは網膜神経節細胞および内顆粒層細胞の傷害制御機構に何らかの働きがあると示唆された。

After 6 hours, 12 hours and 24 hours after reperfusion, the normal network samples were cut into sections and confirmed by crystallin family immuno-staining. _ A3/A1-crystallin, _ C-crystallin network can detect the location, immunology and immunology. Heat shock protein was aware of the loss of B-crystallin after reperfusion, and the failure rate was detected 12 hours after reperfusion. After 6: 12 hours of B2-crystallin and virtual blood reperfusion, the cytopathic acid was detected in the center of granulocytic cells. After 6: 12 hours after the virtual blood was reperfused, we started to know how to detect the disease, and _ B2-crystallin focused on the improvement of the research. There is no significant difference between the two groups in the diagnosis and treatment of the disease. There is an increase in the number of symptoms in 6 hours after the reperfusion of virtual blood, and an increase in the number of patients in 12 hours after the virtual blood is reperfused. There is no significant difference between the two groups. The results of the analysis of the results and the results of the same analysis of the results of the analysis of the results of the tests and the results of the analysis of the results of the tests, the results of the analysis and the results of the RT-PCR were analyzed. 24 hours after ischemia and virtual blood reperfusion, TUNEL staining was performed in the cytopathic cells of the network, and nitrosomes were injected into the siRNA cells of the _ B2-crystallin specialty. after the virtual blood was reperfused, the network analysis was performed. After 12 hours of reperfusion and 24 hours of reperfusion, the amount of TUNEL staining in the cells and the number of TUNEL staining cells in the cells were significantly decreased after 12 hours of reperfusion and 24 hours after reperfusion, respectively. As a result of the above results, there is no indication of instigation in the B2-crystallin network health care system.