角膜内皮細胞の増殖抑制における転写抑制因子の役割

转录抑制因子在抑制角膜内皮细胞增殖中的作用

• 批准号: 17791241
• 负责人: 上甲 武志
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791241/
• 关键词: PLZF; TSC-22; TGF-β2; 培養ヒト角膜内皮細胞; 増殖抑制; 角膜内皮細胞; 転写抑制因子

Micro-arrayによるPLZFのtarget geneの検索PLZFを過剰発現させた細胞において、transforming growth factor beta stimulated clone-22(TSC-22)の遺伝子発現が2.32倍に増加した。Real-time PCR法においても同様に、controlの細胞(LacZを過剰発現させた)に比べて、有意にTSC-22の遺伝子発現量が増加していた。なお、cyclinAやcmycの遺伝子発現には変化が認められなかった、一方、PLZFを過剰発現させた細胞において、遺伝子発現量が低下した遺伝子群の中では、growth factorが比較的多く認められた。Human recombinant TGF-β2のPLZF mRNA発現に対する影響の検討Exogenous human recombinant TGF-β2(R＆Dsystem)(0.1ng/mlから10ng/mlの濃度)を培養ヒト角膜内皮細胞に添加し、48時間後に細胞増殖に対する影響を検討した結果、0.5ng/mlから10ng/mlの濃度において、有意に培養ヒト角膜内皮細胞の増殖を抑制した。TGF-β2添加48時間後にPLZFの発現動態についてreal time PCRを用いて検討した結果、PLZF mRNAの発現量には変化が認められなかった。培養ヒト角膜内皮細胞の増殖はTGF-β2によって有意に抑制された。また、TSC-22はsmad3,4と結合してTGF-βのsignalを増強するとの報告があることより、現在我々は、PLZFによる培養ヒト角膜内皮細胞の増殖抑制のメカニズムの一つとして、TSC-22を介したTGF-βのsignalの増強が関与しているのではないかと考えている。

Microarray PLZF target gene detection PLZF target gene detection in cells, transforming growth factor beta stimulated clone-22(TSC-22) gene detection increased by 2.32 times. Real-time PCR was used to detect and control TSC-22 gene expression in cells (LacZ gene expression). The number of cells and the number of cells in which the gene occurs are lower than those in which the growth factor is lower. Effects of Exogenous human recombinant TGF-β 2(R& D system)(concentrations from 0.1 ng/ml to 10ng/ml) on proliferation of cultured corneal endothelial cells were investigated 48 hours after addition. Results: Growth of cultured corneal endothelial cells was inhibited intentionally at concentrations from 0.5 ng/ml to 10ng/ml. 48 hours after TGF-β2 addition, PLZF expression dynamics were detected by real time PCR, and PLZF mRNA expression was detected by PCR. Growth of cultured corneal endothelial cells was intentionally inhibited by TGF-β2. TSC-22 binding to TGF-β signal enhancement is reported to inhibit proliferation of cultured corneal endothelial cells.

项目成果

The Effects of Promyelocytic Leukemia Zinc Finger Protein on the Proliferation of Cultured Human Corneal Endothelial Cells.

早幼粒细胞白血病锌指蛋白对培养的人角膜内皮细胞增殖的影响。

• 期刊: Molecular Vision (in press)
• 作者: Shen J;Samul R;Silva RL;Akiyama H;Liu H;Saishin Y;Campochiaro PA;Shen J;Takeshi Joko
• 通讯作者: Takeshi Joko