歯周組織に存在する細胞に対する歯周病原性細菌LPSのRANKL誘導能の相違

牙周致病菌LPS诱导牙周组织细胞RANKL能力的差异

• 批准号: 17791558
• 负责人: 中村 弘隆
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791558/
• 关键词: 歯周病原生細菌; LPS; RANKL; 破骨細胞; 骨吸収; 歯周病原性細菌

歯周炎は歯周病原性細菌のLPSが、歯周病の発症に重要な因子であると認識されている。LPSは炎症性細胞を活性化し、IL-1、IL-6,TNF-αなどの炎症性サイトカインを産生する。これらのサイトカインにより歯周組織に存在する様々な細胞が活性化され、破骨細胞形成を誘導することが明らかとなっているが、骨吸収性サイトカインを産生する細胞は数多く存在するため、その特定はできていない。近年、破骨細胞の分化と機能は骨芽細胞や線維芽細胞の細胞膜上に発現するRANKLによって調節されていることが明らかとなった。そして歯周病原性細菌のLPSがRANKL発現を促進することにより破骨細胞の分化を誘導することが明らかになっている。またT細胞もRANKL.を発現し、可溶性RANKLを分泌することが知られており、炎症部位で破骨細胞の分化や機能の調節を行っていることが示された。これまでの研究で、歯周病原性細菌は菌種間でそのLPSの生物学的活性が異なることが報告されてきたが、異なる菌種のLPS刺激により誘導されたRANKL発現量の差異について報告した研究はない。本研究では各種歯周病原性細菌(A.actinomycetemcomitans、P.gingivalis、T.forsythensis)由来LPSによって、線維芽細胞、骨芽細胞、T細胞、B細胞を刺激して、培地上清に分泌された可溶性RANKLの濃度をELISA kitを用いて計測した。マウス大腿骨及び脛骨から骨髄細胞を採取後、骨髄マクロファージを回収し、これにM-CSFとRANKLを、上記実験で得られた濃度と同濃度になるように添加して5日間培養し、破骨細胞を形成した。形成された破骨細胞数を比較して、産生されたRANKLの濃度の相違が破骨細胞形成に関係するかを調査した。

Periodontitis is an important factor in the development of periodontal disease. LPS activates inflammatory cells and produces IL-1, IL-6,TNF-α and inflammatory cytokines. The number of cells that are activated and osteoclast formation induced in the peripheral tissues is increased. In recent years, the differentiation and function of osteoclasts have been regulated by RANKL in the cell membrane of osteoblast and vascular bud cells. LPS from periosteal pathogenic bacteria promotes RANKL production and induces osteoclast differentiation. The expression of RANKL in T cells, the secretion of soluble RANKL, and the regulation of osteoclast differentiation and function at sites of inflammation are shown. In this study, differences in LPS biological activity among different species of pathogenic bacteria were reported, and differences in RANKL production were also reported. In this study, soluble RANKL concentrations were measured by ELISA kit after LPS stimulation, cell culture supernatant secretion, and cell culture supernatant secretion from peripheral pathogenic bacteria (A.actinomycetemcomitans, P.gingivalis, T.forsythensis). After harvesting the femur and tibia, osteoclast cells were formed by adding M-CSF and RANKL at the same concentration. To investigate the relationship between the number of osteoclasts formed and the concentration of RANKL produced and osteoclast formation.