RNA干渉を用いた筋感覚神経関連タンパク質の機能追及

利用 RNA 干扰探索肌肉感觉神经相关蛋白的功能

• 批准号: 17700490
• 负责人: 河野 史倫
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17700490/
• 关键词: 筋感覚神経; 27kDa heat shock protein; ヒラメ筋; 筋萎縮および再生; RNA干渉; 筋萎縮; タンパク質

骨格筋における機械的刺激のフィードバック機構のひとつである筋感覚神経活動を抑制した場合、筋萎縮と並行してリン酸化27kDa heat shock protein(HSP27)の発現抑制が認められた。本研究では、このリン酸化HSP27が骨格筋のサイズ調節において如何なる役割を果たすのか検討した。14週齢のウィスターハノーバー雄ラットを対照群と後肢懸垂群に分け、懸垂群には連続尾部懸垂を施した。7日間の懸垂後、懸垂群を更に回復群および回復+リン酸緩衝液(PBS)群、回復+阻害剤群に分け、回復+阻害剤群には50μg/20μLのHSP27リン酸化阻害ペプチドを、回復+PBS群には同量のPBSを筋注した後、懸垂を解除し5日間回復させた。実験前、7日および12日目にヒラメ筋のサンプリングを行った。凍結横断切片において筋線維横断面積を測定したところ、後肢懸垂により顕著なヒラメ筋線維横断面積の減少(39%)が引き起こされた。回復および回復+PBS群では、懸垂終了時に比べ約50%の筋線維肥大が見られたが、回復+阻害剤群ではわずか12%の増大しか認められなかった。また、筋ホモジネート中におけるリン酸化HSP27発現は、後肢懸垂により減少する傾向にあったが、5日間の回復により顕著に増加した(+83%vs.懸垂終了時)。しかし、回復+阻害剤群では38%の増加しか認められなかった。リン酸化MAPKAPK2発現は、後肢懸垂によって顕著に増加したが、5日間の回復中に減少し、コントロールレベルに近づいた。以上の結果から骨格筋再生においてHSP27のリン酸化が重要な役割を果たすことが分かった。HSP27はin vitroではMAPKAPK2によってリン酸化されることが知られているが、in vivoでは必ずしもこの活性と一致しないことも示唆された。

The mechanism of muscle contraction and the inhibition of the production of 27 kDa heat shock protein (HSP27) are also recognized. This study is to investigate the effects of HSP27 on the regulation of bone marrow cells. 14 weeks ago, the group was divided into two groups: the rear limb group and the rear limb group. 7. During the day, after the suspension, the suspension group is replaced by the recovery group and the recovery + acid buffer solution (PBS) group, the recovery + inhibitor group is replaced by the recovery + inhibitor group, and the recovery + inhibitor group is replaced by the 50 μ g/20 μ L HSP27 acid inhibitor group. After the recovery + PBS group is replaced by the recovery + PBS group, the suspension is released. Before, on the 7th and the 12th, we started to work together. The cross-sectional area of the tendon dimension was measured in frozen sections, and the cross-sectional area of the tendon dimension decreased by 39% in the hind limb overhang. The recovery + PBS group is about 50% larger than the end of the suspension. The recovery + PBS group is 12% larger than the end of the suspension. HSP27 appeared in the middle of the day, and the tendency of the hind limb to hang decreased, and the recovery increased during the day (+83% vs. the end of the hang). 38% increase in recovery + resistance MAPKAPK 2 appears, hind limbs hang, increase, 5 days recover, decrease, close to the center. The above results show that HSP 27 is an important component of bone regeneration. HSP27 is active in vitro and in vivo.

项目成果

Role(s) of nucleoli, phosphorylation of ribosomal protein S6 and/or HSP27 in the regulation of muscle mass.

核仁、核糖体蛋白 S6 和/或 HSP27 磷酸化在肌肉质量调节中的作用。

• 期刊: Am. J. Physiol. Cell Physiol. (in press)
• 作者: Kawano;F.;Y.Matsuoka;Y.Oke;Y.Higo;M.Terada;X.D.Wang;N.Nakai;H.Fukuda;S.Imajoh-Ohmi;Y.Ohira
• 通讯作者: Y.Ohira