An analysis of the role of protein kinase PKN3 in the progress of cancer and a development of new anticancer agent

蛋白激酶PKN3在癌症进展中的作用分析及新型抗癌药物的开发

• 批准号: 18590294
• 负责人: MUKAI Hideyuki
• 金额: $ 2.57万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18590294/
• 关键词: Rho; small GTPase; PKN3; protein kinase; cancer; oncogenesis; knockout mice

We prepared protein kinase PKN3 knockout mice to analyze the function of PKN3 in vivo. PKN3 knockout mice did not show any significant macroscopic morphological abnormalities and problems in reproductive potential and the feeding behavior. We isolated embryonic fibroblasts from PKN3 knockout mice and examined the wound healing activity and RasV12 induced focus forming activity, comparing with the wild type mice. And we crossed PKN3 knockout mice with pten conditional knockout mice which are susceptible to malignant neoplasms, and examined the effect of PKN3 on the tumorigenesis and metastasis. In order to prepare a specific inhibitor for PKN3, we prepared various deletion mutants and point mutants of PKN3 and analyzed the activation mechanism of PKN3 by checking the protein phosphorylation activity of the enzyme. We also checked the effect of PDK1 on the stability and the activation mechanism of PKN3.

我们制备了蛋白激酶PKN3敲除小鼠来分析PKN3在体内的功能。 PKN3基因敲除小鼠没有表现出任何显着的宏观形态异常以及生殖潜力和摄食行为方面的问题。我们从 PKN3 敲除小鼠中分离出胚胎成纤维细胞，并与野生型小鼠进行比较，检查伤口愈合活性和 RasV12 诱导的病灶形成活性。并将PKN3基因敲除小鼠与10只易患恶性肿瘤的条件性基因敲除小鼠杂交，检测PKN3对肿瘤发生和转移的影响。为了制备PKN3的特异性抑制剂，我们制备了PKN3的多种缺失突变体和点突变体，并通过检测该酶的蛋白磷酸化活性来分析PKN3的激活机制。我们还检查了PDK1对PKN3稳定性和激活机制的影响。

项目成果

バイオアップデート-Web2.0自律更新型日本語オープンアクセスジャーナルの公開と研究者口コミ情報の共有-

BioUpdate - 出版Web2.0自更新日本开放获取期刊并分享研究者口碑信息 -

• 发表时间: 2007
• 作者: Huang;CC;Wang;JM;Kikkawa;U;Mukai;H;Shen;MR;Morita;I;Chen;BK;Chang;WC;志賀一博;向井秀幸
• 通讯作者: 向井秀幸

バイオアップデートー-Web2.0自律更新型日本語オープンアクセスジャーナルの公開と研究者口コミ情報の共有-

BioUpdate - 出版Web2.0自更新日本开放获取期刊并分享研究者口碑信息 -

• 发表时间: 2007
• 作者: Mukai;H;Kuno;Y;向井秀幸
• 通讯作者: 向井秀幸

Purification and Kinase assay of PKN

PKN 的纯化和激酶测定

• 发表时间: 2005
• 期刊: Methods in Enzymology, Small GTPases(Elsevier) (in press)
• 作者: Mukai;H.;Ono;Y
• 通讯作者: Y

Fragmentation of Protein Kinase N (PKN) in the Hydrocephalic Rat Brain. Acta Histochem Cytochem.

脑积水大鼠脑中蛋白激酶 N (PKN) 的断裂。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Acta Histochem Cytochem. 40
• 作者: 中野賢二;藤井輝彦;山名秀明;桑野信彦;Huang CC;Huang CC;Okii N
• 通讯作者: Okii N

Purification, kinase assay of PKN

PKN 的纯化、激酶测定

• 发表时间: 2006
• 期刊: Methods Enzymol 406
• 作者: Mukai;H;Ono;Y
• 通讯作者: Y