ヒト舌癌特異的アデノウイルス二重感染法の樹立と応用への基礎

舌癌特異的かつ強力に治療遺伝子を発現させるための基礎実験として、二種類のアデノウイルスベクターを用いる二重感染法の樹立を試みた。二種類のアデノウイルスベクター(Ad. hTERT-CreおよびAd. CALNLZ)をin vitroで舌癌細胞株(HSC-3、 HSC-4、 SAS)に感染させる実験を行ったところ、一種類のアデノウイルスベクター(Ad. hTERT-LacZ)を単独で感染させた場合と比較してLacZ遺伝子の発現を増強させることが確認された(22〜41倍)。この結果を踏まえ、治療遺伝子を搭載したアデノウイルスベクター、Ad. CAL-N116Yを作製した。N116Yとは、Ras抑制変異体である。本研究者らは、N116YがRASの活性化に必要なGDP/GTP交換蛋白質(GDP-GTP exchange protein: GEP)の作用を阻害する事で、舌癌の増殖抑制に有効であることを報告してきた。このベクターを二重感染法に用いる事で、RAS発現が亢進している上記舌癌細胞株に対し、強力な増殖抑制効果を及ぼす事が期待された。一方で、アデノウイルス二重感染法は、in vivoでは期待された効果が確認されなかった、との報告がなされた。これは皮下腫瘍において、投与された二種類のアデノウイルスベクターが十分に拡散してしまい、二重感染する効率が低かったためと考えられる。アデノウイルスベクターは、免疫原性および細胞傷害性が強く、十分な遺伝子発現を得るためにベクター投与量を増加させることには限界がある。この問題に対して、本研究者は単一ベクター上に遺伝子発現の癌特異性ユニットと増強効果ユニットを併せ持った、新しいベクターを開発することで解決できると考え、現在その作製に取り組んでいる。

舌癌特異的かつ強力に治療遺伝子を発現させるための基礎実験として、二種類のアデノウイルスベクターを用いる二重感染法の樹立を試みた。二種類のアデノウイルスベクター(Ad. hTERT-CreおよびAd. CALNLZ)をin vitroで舌癌細胞株(HSC-3、 HSC-4、 SAS)に感染させる実験を行ったところ、一種類のアデノウイルスベクター(Ad. hTERT-LacZ)を単独で感染させた場合と比較してLacZ遺伝子の発現を増強させることが確認された(22〜41倍)。この結果を踏まえ、治療遺伝子を搭載したアデノウイルスベクター、Ad. CAL-N116Yを作製した。N116Yとは、Ras抑制変異体である。本研究者らは、N116YがRASの活性化に必要なGDP/GTP交換蛋白質(GDP-GTP exchange protein: GEP)の作用を阻害する事で、舌癌の増殖抑制に有効であることを報告してきた。このベクターを二重感染法に用いる事で、RAS発現が亢進している上記舌癌細胞株に対し、強力な増殖抑制効果を及ぼす事が期待された。一方で、アデノウイルス二重感染法は、in vivoでは期待された効果が確認されなかった、との報告がなされた。これは皮下腫瘍において、投与された二種類のアデノウイルスベクターが十分に拡散してしまい、二重感染する効率が低かったためと考えられる。アデノウイルスベクターは、免疫原性および細胞傷害性が強く、十分な遺伝子発現を得るためにベクター投与量を増加させることには限界がある。この問題に対して、本研究者は単一ベクター上に遺伝子発現の癌特異性ユニットと増強効果ユニットを併せ持った、新しいベクターを開発することで解決できると考え、現在その作製に取り組んでいる。