矯正歯科治療における歯根吸収メカニズムの分子生物学的解明

正畸治疗中牙根吸收机制的分子生物学阐明

• 批准号: 18791550
• 负责人: 松浦 多喜子
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: University of Fukui
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791550/
• 关键词: 矯正歯科; 歯根吸収; 分子生物学

患者さんに十分説明し同意を得た上で、抜去智歯より歯根の中央1/3付近に付着している歯根膜細胞を採取し、コラーゲンゲル上で三次元培養し、培養開始24時間後にコラーゲンゲルを培養皿からはがすことによって収縮させ、HE染色により細胞形態を観察した。HE染色による観察では、収縮させたコラーゲンゲル上の細胞は丸く変形しており、収縮6時間後には生育細胞数が減少し、収縮24時間後には生育細胞がほとんど認められながった。またTunel染色では、収縮6時間後、24時間後ともにTunel positiveの細胞が観察でき、アポトーシスを起こしている細胞が含まれることがわかった。MTT assayでも生息細胞数の減少を確認できた。さらに、コラーゲンゲル収縮前と、収縮15分後でIL-1β遺伝子の発現を特異的プライマーを使用したRT-PCR法によって検討したが、収縮前後ともにIL-1β遺伝子の発現は検出できなかった。そのため、培養液にIL-1βを添加し、同様に歯根膜細胞を培養したコラーゲンゲルを収縮させた。IL-1βを添加した場合には、IL-1β非添加時と比較して、コラーゲンゲル収縮に伴う細胞数の減少が抑えられることがわかった。western-blot法においては、MAP kinaseの一つであるERKがコラーゲンゲル収縮前、収縮後のどちらのサンプルにおいても同様に検出できたため、特異的部位のリン酸化認識抗体を用いてERKの活性化状態の違いを検討したが、ERKの活性化は検出できなかった。

Patients さ ん に was し agree to を た で, sorting to mentally 歯 よ り 歯 root の central one-third nearly に pay the し て い る 歯 root membrane cells を take し, コ ラ ー ゲ ン ゲ ル で three yuan cultivation し, began after 24 time に コ ラ ー ゲ ン ゲ ル を petri dish か ら は が す こ と に よ っ て 収 shrinkage さ せ, HE staining に よ り cells form を 観 examine し た . HE dyed に よ る 観 examine で は, 収 shrinkage さ せ た コ ラ ー ゲ ン ゲ ル の cells は pill on く - shaped し て お り, 収 shrinkage after six time に は reproductive cells number が reduce し, 収 shrink after 24 time に は reproductive cells が ほ と ん ど recognize め ら れ な が っ た. ま た Tunel staining で は 収 shrinkage. 6, 24 time after time と も に Tunel positive cells の が 観 examine で き, ア ポ ト ー シ ス を up こ し て い が る cells contain ま れ る こ と が わ か っ た. MTT assayで a reduction in the number of germinated cells を confirms で た た. さ ら に, コ ラ ー ゲ ン ゲ ル 収 shrinkage と, 収 shrink after 15 points before で IL - 1 beta heritage 伝 son の 発 now を specific プ ラ イ マ ー を use し た rt-pcr method に よ っ て beg し 検 た が, 収 shrinkage と も に IL - 1 beta heritage 伝 son の 発 now は 検 out で き な か っ た. そ の た に め, cultures of IL - 1 beta を add し, with others in に 歯 root membrane cell を culture し た コ ラ ー ゲ ン ゲ ル を 収 shrinkage さ せ た. IL - 1 beta を add し た occasions に は, IL - 1 beta not add と more し て, コ ラ ー ゲ ン ゲ ル 収 shrinkage に with う cell number の reduce が or え ら れ る こ と が わ か っ た. western-blot method にお にお て て, MAP A kinase の つ で あ る ERK が コ ラ ー ゲ ン ゲ ル 収 shrink after former, 収 shrinkage の ど ち ら の サ ン プ ル に お い て も with others に 検 out で き た た め, specific parts of the の リ ン acidification know antibody を with い て ERK の activation state の violations い を beg し 検 た が, ERK の activeness は 検 out で き な か っ た.